小干擾RNA對(duì)鼻咽癌CNE-2細(xì)胞Bcl-2基因的放射增敏研究.pdf

1、目的：鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是我國(guó)南方各省常見的惡性腫瘤,治療手段首選放射治療。放射治療對(duì)早期鼻咽癌效果較好,但對(duì)晚期鼻咽癌因易出現(xiàn)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和局部復(fù)發(fā),因此療效欠佳。RNA干擾技術(shù)是當(dāng)今研究鼻咽癌基因治療領(lǐng)域的一個(gè)熱點(diǎn)。有研究證實(shí),Bcl-2(B-cell Leukemia2)與鼻咽癌的細(xì)胞增殖、凋亡有密切關(guān)系,本研究的目的是采用RNA干擾技術(shù)抑制Bcl-2基因在鼻咽癌CNE-2細(xì)胞中的表達(dá),

2、并行轉(zhuǎn)染后細(xì)胞x射線照射,探討特異性Bcl-2siRNA對(duì)鼻咽癌細(xì)胞的輻射增敏作用。
　　 方法：⑴構(gòu)建Bcl-2基因的特異性siRNA的表達(dá)載體,并借助脂質(zhì)體將其轉(zhuǎn)入鼻咽癌CNE-2細(xì)胞。熒光顯微鏡觀察轉(zhuǎn)染效率。⑵AnnexinV-FITC/PI雙染流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)轉(zhuǎn)染后Bcl-2蛋白在鼻咽癌細(xì)胞的表達(dá),并檢測(cè)鼻咽癌CNE-2細(xì)胞的凋亡率。⑶流式細(xì)胞儀檢測(cè)Bcl-2基因的特異性siRNA真核表達(dá)載體聯(lián)合x射線照射后鼻咽癌CNE