RNA編輯酶ADAR1在大鼠肝移植排斥反應及人肝癌中的表達及意義.pdf

1、本研究分為兩部分，分別從移植排斥反應和肝癌這兩個肝膽外科目前的熱點領域入手，探索大鼠肝移植排斥反應以及人肝癌、癌旁組織中RNA編輯酶ADAR1的表達變化及意義。 第一部分：探索大鼠肝移植排斥反應中RNA編輯酶ADAR1的表達變化以及意義。 研究方法：健康成年雄性SD大鼠和Wistar大鼠105只，體重200-250g，受體體重略大于供體；由第四軍醫(yī)大學實驗動物中心提供。飼養(yǎng)條件符合SPF動物標準。隨機分為4組：(1)非排

2、斥組(n=15)：取Wistar大鼠的肝臟原位移植給Wistar大鼠；(2)排斥反應組(n=15)：取SD大鼠的肝臟移植給Wistar大鼠；(3)抗排斥反應組(n=15)：取SD大鼠的肝臟移植給Wistar大鼠，術后肌注FK506(2mg/kg/d)；(4)對照組(n=15)：對Wistar大鼠不行肝移植，僅行開關腹手術。根據Kamada報道的術式加以多項技術改進建立大鼠原位肝移植模型。各組又隨機分為3、5、7d三個時相點，每個時相點各

3、處死5只，即時活殺大鼠取脾臟組織。切除后立即取100mg標本于-196℃液氮中凍存，同時在4％多聚甲醛保存，備做RT-PCR及病理學檢查。 研究結果：移植后不同時間點，排斥反應組與非排斥組、抗排斥反應組以及對照組比較，RNA編輯酶ADAR1表達均顯著增高，P＜0.001；FK506抑制大鼠肝移植急性排斥反應后，RNA編輯酶ADAR1升高幅度顯著下降。 提示：RNA編輯酶ADAR1在大鼠肝移植急性排斥反應的發(fā)生發(fā)展中起作用

4、。 第二部分：探索人肝癌、癌旁組織中RNA編輯酶ADAR1的表達變化及意義。 研究方法：連續(xù)收集自2004年12月到2005年04月，我科手術病理證實的、未行栓塞化療的41例肝細胞肝癌患者標本，同時收集部分對照標本。取新鮮肝癌中最典型的癌灶部分、癌旁組織以及對照肝組織，將所有組織進行RT-PCR檢測。 研究結果：所有肝癌組織RNA編輯酶ADAR1均有表達，相對表達量為3.340±0.863；所有癌旁組織RNA編輯

5、酶ADAR1相對表達量為0.801±0.209;作為對照的26例正常肝組織及其他肝臟疾病標本檢測到RNA編輯酶ADAR1的相對表達量為0.880±0.226。將肝癌組織和癌旁組織檢測到的ADAR1mRNA的表達量進行成組t檢驗，兩者間存在顯著性差異(t=18.30，P＜0.001)；將肝癌組織和對照肝組織檢測到的ADAR1mRNA的表達量進行成組t檢驗，兩者間亦存在顯著性差異(t=14.08，P＜0.001);將癌旁組織和對照肝組織檢測

6、到的ADAR1mRNA的表達量進行成組t檢驗，兩者間差異無統(tǒng)計學意義(t=1.45，P＞0.10)。將從同一患者取材的肝癌組織和癌旁組織檢測到的ADAR1mRNA的表達量進行配對t檢驗，兩者間存在顯著性差異(t=18.53，P＜0.001)。 研究結論： 1、在大鼠原位肝移植發(fā)生急性排斥反應時，ADAR1增高程度與排斥反應的強度有明顯關系。FK506可以抑制ADAR1的表達，明顯減輕移植肝組織的急性排斥反應。 2