聚乙二醇修飾的蓖麻蛋白毒素A鏈偶聯(lián)物的制備及其生物學(xué)特性的研究.pdf

1、目的：研究?jī)煞N不同分子量以及不同連接鍵的聚乙二醇(polyethyleneglycol，PEG)與蓖麻毒蛋白A鏈(RicinToxinAChain，RTA)偶聯(lián)，并比較了偶聯(lián)物與游離的RTA在體內(nèi)外毒性以及藥代動(dòng)力學(xué)方面的改變。 方法：從天然蓖麻籽中提取純化的RTA，并分別與相對(duì)分子量(Mr)為5KD和10KD的單甲氧基聚乙二醇(Monomethoxypolyethyleneglycol，mPEG)反應(yīng)偶聯(lián)，得到兩種不同的RTA

2、-mPEG偶聯(lián)物。并通過(guò)測(cè)定其半數(shù)致死量(LD50)來(lái)比較它們?cè)谛∈篌w內(nèi)的毒性。用MTT比色法對(duì)RTA及不同偶聯(lián)物的體外細(xì)胞毒性進(jìn)行評(píng)價(jià)和比較。此外建立大鼠皮下腫瘤模型，并將其分為三組，用125I標(biāo)記RTA及其PEG偶聯(lián)物，將標(biāo)記后的三種藥物(125I-RTA,125I-RTA-mPEG-MAL和125I-RTA-mPEG-OPSS)通過(guò)尾靜脈分別注入三組大鼠體內(nèi)，在不同時(shí)間點(diǎn)分批處死大鼠，行組織分布測(cè)定，并相互比較。 結(jié)果：體

3、內(nèi)外急性毒性實(shí)驗(yàn)表明，與mPEG偶聯(lián)后的RTA的毒性明顯下降，且下降的程度與mPEG的相對(duì)分子量的大小有關(guān)。組織分布實(shí)驗(yàn)表明，RTA-mPEG偶聯(lián)物的生物半衰期較RTA有明顯延長(zhǎng)，且隨時(shí)間的延長(zhǎng)RTA-mPEG偶聯(lián)物的瘤/非瘤組織的放射性比值與RTA比顯著增大。在肝、脾臟組織，注射后1小時(shí)測(cè)得RTA攝取率大于RTA-mPEG偶聯(lián)物。 結(jié)論：聚乙二醇能遮蔽RTA，使其毒性有明顯下降。此外通過(guò)聚乙二醇的修飾，使RTA生物半衰期大大延