甘藍型油菜PEP基因片段的克隆和種子特異性反義表達載體的構建及轉基因油菜的獲得.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、油菜是最重要的油料作物之一,也是我國的主要經濟作物,在國民經濟中占有重要地位。其油主要食用,其餅粕主要用于飼料。近年來人們對油菜的品質不斷改良,并且菜籽油也大量應用于化工、能源領域,轉基因油菜也用來生產生物柴油的原料等。由于油菜用途的不斷拓展,對其研究也不斷深入。近年來,利用基因工程手段,提高種子的含油量,增加其經濟價值,成為研究的重要目標。 丙酮酸羧化酶(PEP)是控制油菜蛋白質/油脂含量比例的一個關鍵酶,抑制PEP基因的表達

2、,可提高種子的含油量。本研究利用PCR.法從甘藍型油菜花油5號(H045)克隆了PEP基因片段,與種子特異性表達載體pBI421-B構建了反義PEP基因的種子特異性植物表達載體,;并以甘藍型油菜花油5號(H045)為材料,利用激光微束穿刺法將其轉化到甘藍型油菜中,通過卡那抗性和PCR.方法鑒定,獲得了轉基因植株。本研究利用激光微束穿刺法將外源基因成功導入油菜中,克服了油菜農桿菌轉化存在的眾多問題,諸如轉化頻率低,重演性差,基因型限制等,

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