NT-3基因修飾嗅鞘細胞移植促進脊髓損傷再生的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:脊髓損傷是常見疾患,造成許多病人肢體功能的障礙。嗅鞘細胞(OEG)兼有雪旺氏細胞與星形膠質(zhì)細胞的雙重功能特點,它能伴從PNS進入CNS而不同于雪旺氏細胞僅局限于PNS中,克服雪旺氏細胞與成纖維細胞在脊髓移植中功能的不足;嗅鞘細胞能在損傷段為再生神經(jīng)纖維形成髓鞘,保護其不受局部抑制因子的影響;嗅鞘細胞尚可分泌多種神經(jīng)生長因子。OEG移植治療脊髓損傷的具有良好的前景。但由于OEG本身表達神經(jīng)營養(yǎng)因子的水平較低,尚不能滿足軸突再生的需要

2、,實驗中在損傷稍遠處觀察到再生軸突的數(shù)量仍較少。NT-3是NTs家族眾多的成員中最有效的一種,其對軸突再生的促進效果優(yōu)于NGF和BDNF。但由于外源性神經(jīng)營養(yǎng)因子不能通過血腦屏障,半衰期短,臨床應用上尚缺乏安全有效的給藥途徑。本研究的目的是將攜帶NT-3基因的真核表達載體,通過非病毒轉染途徑轉入OEG中,再將轉染后OEG移植到脊髓損傷大鼠體內(nèi),以期促進大鼠胸脊髓損傷的恢復。 方法:將我室自形構建的質(zhì)粒pEGFP-NT3,應用脂質(zhì)

3、體介導的方法將其導入體外培養(yǎng)的嗅鞘細胞,將其移植入急性脊髓損傷大鼠體內(nèi),連續(xù)觀察12周時間,與接受單純OEG、空白質(zhì)粒轉染OEG移植的脊髓損傷大鼠進行比較。 結果:轉染后OEG體外可檢測到NT3mRNA的表達量的增加,細胞裂解液可檢測到NT-3蛋白的表達,同時,此上清對脊神經(jīng)節(jié)細胞的存活與突起生長具促進作用。移植轉染后OEG能在體內(nèi)長期存活,表達NT-3基因,并較對照組更能促進脊髓損傷區(qū)軸突的再生和后肢功能的恢復。 結論

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