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文檔簡介
1、干旱脅迫對植物生長發(fā)育造成嚴重的損傷。小麥作為一種主要的糧食作物,如何有效緩解其在干旱脅迫下所受損傷,是解決人們生存大計的重要課題。三唑類化合物具有植物生長調節(jié)作用,同時可有效緩解非生物脅迫等對植物體的迫害。本文通過觀察己唑醇硝酸銅配合物對植物氣孔和根的形態(tài)影響,以及干旱脅迫下配合物對小麥幼苗ABA含量及ABA相關基因(ABA合成關鍵基因9-cis-epoxycarotenoid dioxigenase(NCED)和ABA分解重要基因A
2、BA8'-hydroxylase(CYP707A1)表達的影響,探究其是否可以緩解脅迫對植物造成的損害,提高植物體的耐早性。
(1)小麥和煙草葉片下表皮組織,進行不同濃度配合物溶液和不同時間處理。0-100μM配合物處理1h,隨著配合物濃度增加,煙草和小麥氣孔開度逐漸減小,100μM時兩者氣孔開度達到最小值。設定的6個濃度(0μM、20μM、40μM、60μM、80μM、100μM)下,煙草氣孔開度平均值從2.37μm減小到0
3、.90μm。而小麥氣孔開度平均值大小為:1.06μm、0.96μm、0.75μm、0.63μm、0.59μm、0.55μm。0-9h不同時間配合物處理下,煙草和小麥氣孔孔徑同樣隨著處理時間的延長,逐漸減小。煙草氣孔孔徑平均值在80μM配合物處理后,從-0h的2.37μm減小到9h的0.94μm。小麥經60μM配合物處理,氣孔孔徑相比對照依次減小40.6%(1h)、49.1%(3h)、50.9%(6h)、54.7%(9h)。己唑醇硝酸銅配
4、合物可降低植物氣孔孔徑。
掃描電鏡觀察小麥根尖在60μ-M己唑醇硝酸銅配合物處理下的變化。對照組小麥根尖根毛稀疏、短粗。處理組小麥根尖根毛濃密、纖長。兩組根尖形態(tài)學上端無明顯差別,而從距根尖形態(tài)學上端5mm處開始處理組根毛相比對照組濃密、纖長。
(2)利用實時定量PCR(real-time quantitative PCR,RT-qPCR)方法探究己唑醇硝酸銅配合物在干旱脅迫下對小麥幼苗ABA含量和相關基因NCED和
5、CYP707A1表達量的影響。結果顯示,干旱狀態(tài)下,對照組和己唑醇硝酸銅配合物處理組NCED表達量均低于未處理0h時的表達量。但在失水過程中(24-144h)對照組表達量逐漸升高,而處理組NCED表達量先降低(24-48h)后升高(96-144h);復水后(144-194h)兩組表達量均下調表達。ABA分解關鍵基因CYP707A1表達量在整個處理過程中,相對0h時都有所增高,對照組在144h達到最高,處理組168h表達量最高。同樣,對照
6、組和處理組CYP707A1表達趨勢不同,對照組表達量在干旱階段均高于處理組,復水后卻低于處理組。實驗發(fā)現,CYP707A1表達量的變化大于NCED。
脅迫下,小麥幼苗葉片對照組和處理組ABA含量相對0h都升高,96h達到最大值,分別為0h的4.38倍、4.64倍。整個過程中,處理組ABA高于對照組,所以,配合物具有提高小麥幼苗干旱耐受效能。
(3)通過對CYP707A1基因表達量的檢測,驗證了結合PCR擴增技術及金納
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