表皮神經(jīng)嵴干細(xì)胞修復(fù)大鼠坐骨神經(jīng)缺損.pdf

1、周圍神經(jīng)的缺損修復(fù)和功能重建一直是神經(jīng)外科領(lǐng)域的難題之一。自體神經(jīng)移植是目前臨床上常規(guī)的治療方法，但由于供體神經(jīng)缺乏、修復(fù)長(zhǎng)度有限、供體區(qū)域功能喪失、神經(jīng)瘤和自發(fā)神經(jīng)痛等問(wèn)題，其臨床應(yīng)用受到很大限制。同種異體神經(jīng)移植除了要面對(duì)以上問(wèn)題外，還要克服免疫排斥反應(yīng)。因此，應(yīng)用組織工程種子細(xì)胞修復(fù)周圍神經(jīng)缺損可以為這一難題的解決提供幫助。
　　神經(jīng)嵴干細(xì)胞是一種多向潛能神經(jīng)干細(xì)胞，它是周圍神經(jīng)系統(tǒng)的原基，也是Schwann cells的祖

2、細(xì)胞。毛囊來(lái)源的神經(jīng)嵴干細(xì)胞(Epidermal Neural CrestStem Cells，EPI-NCSCs)由于取材方便，具有分化為周圍神經(jīng)系統(tǒng)神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞的潛能，是一種具有良好應(yīng)用前景的組織工程種子細(xì)胞。目前，在神經(jīng)損傷修復(fù)領(lǐng)域中，EPI-NCSCs主要被應(yīng)用于脊髓損傷的修復(fù)。聚乳酸-聚羥基乙酸共聚物(poly(DL-lactide-co-glycolide)，PLGA)是一種人工合成生物可降解性材料，被認(rèn)為是一種較為理想

3、的人工神經(jīng)支架材料。為了探討EPI-NCSCs對(duì)周圍神經(jīng)缺損的修復(fù)作用，對(duì)原代培養(yǎng)的GFP-SD大鼠來(lái)源的EPI-NCSCs的體外性質(zhì)進(jìn)行了考察，并以其為種子細(xì)胞，將其等量與細(xì)胞外基質(zhì)(Extracellular matrix，ECM)混合后，預(yù)置入PLGA導(dǎo)管中，同時(shí)，以等量的達(dá)爾伯克（氏）改良伊格爾（氏）培養(yǎng)基(Dulbecco's Modified Eagl's medium，DMEM)代替EPI-NCSCs作為對(duì)照，以用于修復(fù)大

4、鼠坐骨神經(jīng)10 mm距離的缺失。噻唑藍(lán)(Methylthiazolyltetrazolium，MTT)試驗(yàn)結(jié)果顯示，EPI-NCSCs在PLGA膜上的初期粘附率為89.7％。在第1、3、5、7天細(xì)胞相對(duì)增殖率分別為89.3％、87.6％、85.6％、96.6％。細(xì)胞周期與DNA倍體分析表明，與PLGA共培養(yǎng)的EPI-NCSCs與單獨(dú)培養(yǎng)的EPI-NCSCs相比較，二者的細(xì)胞周期變化趨勢(shì)相同，增殖指數(shù)變化趨勢(shì)也相同。RT-PCR和熒光免疫