兩個(gè)枇杷品種成熟期果肉生理生化與蛋白質(zhì)組分析.pdf

1、枇杷(Eriobotrya japonica Lindl.),是原產(chǎn)于我國(guó)的一種亞熱帶水果。根據(jù)果實(shí)的顏色，一般將枇杷分為兩類(lèi)：紅肉和白肉枇杷。一般情況下，與紅肉枇杷相比，白肉枇杷的果肉色澤發(fā)白，肉質(zhì)更加細(xì)膩多汁，香甜適口，貯藏期較短。而紅肉枇杷的果肉肉質(zhì)偏黃或紅，口感較差，但貯藏期更長(zhǎng)。
　　在本次實(shí)驗(yàn)中我們選取了成熟期兩個(gè)品種的枇杷的果實(shí)：‘黃金塊’(紅肉)枇杷和‘太城白蜜’(白肉)枇杷作為材料，研究了它們的果肉在成熟期的一些

2、生理指標(biāo)和蛋白質(zhì)組表達(dá)差異特征。
　　1.本文測(cè)定了類(lèi)胡蘿卜素、可溶性糖和可滴定酸的含量。結(jié)果表明，‘黃金塊’枇杷可溶性糖含量大約是62mg/g，‘太城白蜜‘枇杷大約是97mg/g?！S金塊’枇杷可滴定酸度為0.14mmol/100g，‘太城白蜜’枇杷為0.04mmol/100g?！S金塊’枇杷類(lèi)胡蘿卜素含量為14mg/g,‘太城白蜜’枇杷含量為2mg/g。這表明紅肉枇杷類(lèi)胡蘿卜素含量較高，果色鮮艷，但果肉糖酸比低，果肉偏酸，可食

3、性較差。
　　2.本文對(duì)多酚氧化酶、超氧化物歧化酶、抗壞血酸脫氫酶和肉桂醇脫氫酶的活性進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果顯示，‘太城白蜜’枇杷多酚氧化酶的酶活性大概為‘黃金塊’枇杷的兩倍；兩種枇杷的抗壞血酸過(guò)氧化物酶及超氧化物歧化酶的酶活性變化差異較?。弧前酌邸凌说娜夤鸫济摎涿傅幕钚韵鄬?duì)于‘黃金塊’枇杷果實(shí)要高。因此，‘太城白蜜’枇杷果實(shí)較不耐貯存，而且在貯存過(guò)程會(huì)形成較多的木質(zhì)素。
　　3.本文利用蛋白質(zhì)組技術(shù)對(duì)成熟期的兩種枇杷果實(shí)的差

4、異蛋白進(jìn)行分析，采用雙向電泳分離蛋白，在‘黃金塊’枇杷果肉中檢測(cè)到835個(gè)蛋白點(diǎn)，而在‘太城白蜜’枇杷果肉中到檢測(cè)826個(gè)蛋白點(diǎn)。以‘黃金塊’枇杷作為試驗(yàn)組，‘太城白蜜’枇杷作為對(duì)照組，經(jīng)ImageMaster軟件分析后，顯示有46個(gè)差異明顯的蛋白質(zhì)點(diǎn)，經(jīng)MALDI-TOF-TOF質(zhì)譜分析，成功鑒定出40個(gè)非冗余蛋白，其中36個(gè)上調(diào)表達(dá)，4個(gè)下調(diào)表達(dá)。通過(guò)生物信息學(xué)分析，可將這些蛋白可分為:1.脅迫反應(yīng)和防御相關(guān)蛋白（10）；2.能量和

5、物質(zhì)代謝相關(guān)蛋白（10）；3.次生代謝相關(guān)蛋白（3）；4.蛋白質(zhì)代謝相關(guān)蛋白（4）；5.信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)相關(guān)蛋白（7）；6.過(guò)敏原蛋白；7.未分類(lèi)的蛋白（4）。對(duì)差異蛋白的功能進(jìn)行分析結(jié)果表明：（1）在成熟期，兩個(gè)品種枇杷果實(shí)中與類(lèi)胡蘿卜素合成相關(guān)的蛋白表達(dá)豐度未出現(xiàn)明顯差異；（2）果實(shí)的貯藏性是多種蛋白相互作用的結(jié)果。信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白如14-3-3蛋白的上調(diào)表達(dá)，使果實(shí)提高忍受環(huán)境脅迫的能力；抗性脅迫相關(guān)蛋白以及MDH的上調(diào)表達(dá)，可增加還原力和能

6、量供給，提高細(xì)胞清除自由基和毒素的能力，防止蛋白變性、凝聚，維持細(xì)胞膜的流動(dòng)性和完整性，提高抗逆性。從而使果實(shí)貯藏較長(zhǎng)時(shí)間。
　　4.本文對(duì)HSP70蛋白進(jìn)行了Western blot分析，其結(jié)果與雙向電泳的結(jié)果一致；對(duì)過(guò)敏原蛋白major allergen Mal d1基因進(jìn)行克隆，利用得到的保守區(qū)序列和蘋(píng)果的同源基因進(jìn)行比對(duì)發(fā)現(xiàn)，兩者的相似度達(dá)到98％。這一結(jié)果顯示我們的結(jié)果是可信的，也加深了對(duì)水果這一過(guò)敏源的了解，并為在分子