洛鉑對人胃癌細胞株放射敏感性影響的基礎研究.pdf

1、目的:觀察洛鉑(LBP)對人胃癌細胞株BGC823和SGC7901放射敏感性的影響，探討可能的機制。
　　方法：(1)MTT法測定不同濃度LBP對人胃癌細胞株BGC823和SGC790124小時細胞增殖抑制率，計算半數抑制濃度(IC50)，以20％IC50作為增敏濃度；(2)克隆形成實驗測定兩株細胞單純照射組(X射線照射劑量設為：0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy、8Gy)和加藥+照射組(LBP增敏濃度+0 Gy、2 Gy、4

2、 Gy、6 Gy、8Gy)細胞存活率，繪制細胞存活曲線、計算放射增敏比(SER)和確定干預照射劑量；(3)流式細胞術(FCM)測定兩株細胞空白對照組(不照射、不加藥)、單純照射組(干預劑量X射線)、加藥+照射組(增敏濃度LBP+干預劑量X射線)的細胞周期及凋亡率；(4)Western Blotting測定兩株細胞空白對照組、單純照射組、加藥+照射組凋亡相關蛋白Bcl-2、Bax及cleaved caspase-3表達水平。
　　結

3、果：(1)人胃癌細胞株BGC823和SGC7901增殖抑制率隨LBP濃度升高而升高，呈量一效關系，兩株細胞IC50分別為16.08ug/ml和20.66ug/ml，增敏濃度分別選用3.2ug/ml和4.0 ug/ml；(2)兩株細胞單純照射組、加藥+照射組細胞存活率隨X射線劑量增加而減小，取4Gy為干預照射劑量，SER分別為1.13和1.08；(3)兩株細胞單純對照組、加藥+照射組細胞周期分布與空白對照組相比，加藥+照射組與單純照射組相

4、比，G2/M期比例均升高、S期比例降低，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。兩株細胞照射后出現G2/M期阻滯，S期分布比例減少，加入LBP，G2/M期比例進一步增加、S期比例減少。兩株細胞加藥+照射組、單純照射組凋亡率均高于空白對照組，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，加約+照射組細胞凋亡率較單純放射組升高(P<0.05)；(4)兩株細胞單純照射組、加約+照射組的蛋白表達水平與空白對照組的相比，Bcl-2表達水平降低，Bax、cleav

5、ed caspase-3表達水平升高，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.01)，加藥+照射組與單純照射組相比，Bcl-2表達水平進一步下降，Bax、cleaved caspase-3表達水平升高，具有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。照射后，細胞抗凋亡蛋白Bcl-2表達水平下降，促凋亡蛋白Bax表達水平升高，激活Caspase-3，其活化產物cleaved caspase-3表達水平升高，LBP增強下調Bcl-2和上調Bax的表達水平。