人參總皂苷的微生物轉化及藥理活性研究.pdf

1、目的：考察從土壤中分離出的微生物（YS2-2）對人參總皂苷的生物轉化作用；并考察轉化產(chǎn)物作對Hela（宮頸癌細胞）的抑制以及對S180小鼠肉瘤的抑制作用。論文還考察了發(fā)酵產(chǎn)物對APAP（對乙酰氨基酚）所致小鼠肝損傷的保護作用。方法：從土壤中分離篩選出人參皂苷生物轉化高效菌株 YS2-2，對人參總皂苷進行生物轉化。轉化條件為：R2A培養(yǎng)基，30℃震蕩培養(yǎng)4天。通過TLC（薄層色譜法）、HPLC（高效液相色譜法）檢測其轉化產(chǎn)物；將轉化產(chǎn)物用

2、DMSO（二甲基亞砜）配制成濃度分別為200μg/mL、100μg/mL、50μg/mL、25μg/mL。采用MTT法測定對宮頸癌細胞的抑制率；用腹水型S180腫瘤細胞，調整細胞濃度為1×107個/mL。將稀釋的瘤液接種于小鼠右腋下，每只小鼠0.2 mL造模24小時后，灌胃給予發(fā)酵人參300 mg/kg，150 mg/kg，50 mg/kg，7天后稱定腫瘤、胰腺及脾臟重量，考察發(fā)酵人參對S180的抑制作用及對免疫器官的影響。在考察發(fā)酵人

3、參對肝保護的實驗中，將藥物配置成300 mg/kg，200 mg/kg，1000 mg/kg，給予APAP所致小鼠肝損傷模型，測定其血清中的ALT（谷丙轉氨酶）、AST（谷草轉氨酶）值以及肝臟勻漿中的SOD（超氧化物歧化酶）、GSH（谷胱甘肽）值。結果：微生物 YS2-2對人參皂苷具有較強的轉化能力，其轉化產(chǎn)物為人參稀有皂苷Rg3和C-K。不同濃度的發(fā)酵人參對宮頸癌細胞的抑制率分別為29.48％，31.65%，34.53%，68.22%

4、。大中小劑量對S180小鼠肉瘤的抑制率分別為53.03%，34.51%，27.67%。對APAP所致小鼠肝損傷模型中，在給予300，200，100 mg/kg發(fā)酵人參后，可以降低因APAP導致的肝損傷小鼠血清中AST、ALT活力及肝臟中SOD、GSH水平。結論：從土壤中分離出的微生物YS2-2能夠轉化人參皂苷；并且轉化產(chǎn)物對宮頸癌細胞有抑制作用，低濃度的抑制作用最為明顯；對 S180小鼠肉瘤細胞的抑制作用，在高濃度是最為明顯；發(fā)酵人參對