維醫(yī)四種正常體液質(zhì)人群腸道菌群結構分布特征研究.pdf

1、目的：了解維吾爾醫(yī)學四種正常體液質(zhì)人群腸道菌群結構的多樣性以及四種體液質(zhì)之間菌群分布的差異性，比較體液分型之間和菌群的分布可能存在的差異，本研究通過維吾爾醫(yī)學體液和氣質(zhì)學說將以健康人為研究對象分為四種體液質(zhì)，從現(xiàn)代分子生物學的角度，應用ERIC-PCR指紋圖譜技術及變性梯度凝膠電泳(DGGE)指紋圖譜技術對維吾爾醫(yī)學正常四種體液質(zhì)人群腸道菌群分布狀況進行分析比較。
　　 方法：①對206例健康人進行維吾爾醫(yī)學體液分型，其中血液質(zhì)

2、（53人），粘液質(zhì)(51人)，膽液質(zhì)（50人）和黑膽質(zhì)(52人)采集受檢者糞便樣品，提取總DNA，以此作為模板獲得反映腸道菌群組成的ERIC-PCR指紋圖譜；計算各樣本多樣性指數(shù)和群落相似性系數(shù)，得到四種正常體液質(zhì)人腸道菌群分布的相似性與多樣性。②對四種體液質(zhì)受檢者糞便樣品提取細菌總DNA，針對16S rDNA的V6～V8可變區(qū)設計一對通用引物并擴增該區(qū)，用PCR產(chǎn)物進行DGGE，得到反映腸道菌群結構特征的DNA指紋圖譜進行比較分析，條

3、帶回收、克隆、序列測定。
　　 結果：①ERIC-PCE指紋圖譜血液質(zhì)組樣品條帶數(shù)顯著多于其他三組（P＜0.05），粘液質(zhì)組樣品條帶數(shù)少于其他3組（P＜0.05）血液質(zhì)組腸道菌群結構較其他各組具有更豐富的多樣性（P＜0.05），粘液質(zhì)組菌群結構多樣性相對較低（P＜0.05）②PCR-DGGE指紋圖譜血液質(zhì)組樣品條帶數(shù)顯著多于其他三組（P＜0.05），粘液質(zhì)組樣品條帶數(shù)少于其他3組（P＜0.05）③各組內(nèi)出現(xiàn)頻率多的能代表各組樣品