水飛薊賓誘導唾液腺腺樣囊性癌ACC-M細胞自噬的研究.pdf

1、本文對水飛薊賓誘導唾液腺腺樣囊性癌ACC--M細胞自噬進行了研究。本研究分為兩個部分：
　　第一部分：自噬相關蛋白在腺樣囊性癌組織中的表達及其意義。
　　目的：研究微管相關蛋白1輕鏈3(microtubule associated protein1 light chain3，LC3)在唾液腺腺樣囊性癌組織中的表達并探討其在腺樣囊性癌發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　方法：免疫組織化學方法檢測45例腺樣囊性癌組織及23例正常唾液腺

2、組織標本中LC3的表達。
　　結果：腺樣囊性癌組織和正常腺體組織中LC3表達陽性率分別為42.22％和91.30％，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。
　　結論：LC3在腺樣囊性癌組織中的陽性表達低于正常腺體組織，自噬可能與腺樣囊性癌的發(fā)生發(fā)展有關。
　　第二部分：水飛薊賓誘導唾液腺腺樣囊性癌ACC-M細胞自噬的實驗研究。
　　目的：探討水飛薊賓(silibinin，SB)對人唾液腺腺樣囊性癌ACC-M細胞增殖

3、及自噬的影響。
　　方法：MTT法檢測水飛薊賓對ACC-M細胞體外生長的抑制作用;倒置相差顯微鏡觀察水飛薊賓對ACC-M細胞形態(tài)學的影口向;丹磺酰戊二胺(monodansyl cadaverine，MDC)染色及透射電子顯微鏡觀察自噬體形成;Western blot檢測自噬相關蛋白微管相關蛋白1輕鏈-3(microtubule associated protein1 light chain3，LC3)表達的變化，數(shù)據(jù)以(x)±s表

4、示，采用SPSS13.0軟件包進行單因素方差分析，P＜0.05為差異具有顯著性。
　　結果：水飛薊賓呈劑量和時間依賴的方式抑制ACC-M細胞生長，并誘導細胞發(fā)生自噬;MDC染色可見自噬體增多，細胞質內呈密集的點狀亮綠色熒光，電鏡下實驗組細胞內可見到雙層膜結構;Western blot顯示水飛薊賓上調ACC-M細胞LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ蛋白的表達，LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值隨著水飛薊賓干預劑量的增大和時間的延長而增加。
　　結