樺褐孔菌菌株遺傳多樣性的SRAP和RSAP分析.pdf

1、樺褐孔菌是十分珍稀和名貴的藥用真菌，近幾年來(lái)由于人們過(guò)度采摘瀕臨滅絕，雖然樺褐孔菌的人工栽培取得了成功，但是生物學(xué)效率低，新品種的選育方面更是空白。本文利用SRAP和RSAP分子標(biāo)記技術(shù)對(duì)采自中國(guó)、芬蘭、俄羅斯、日本、朝鮮等5個(gè)不同國(guó)家及地區(qū)的20個(gè)樺褐孔菌菌株的遺傳多樣性進(jìn)行了分析，以期為樺褐孔菌資源的科學(xué)保護(hù)與利用提供參考，主要研究結(jié)果如下：
　　1.確定了樺褐孔菌SRAP-PCR的最適25μl反應(yīng)體系為：10×buffer2

2、.5μl，模板DNA20 ng，引物濃度0.3μmol·L-1，dNTPs濃度150μmol·L-1，Taq DNA聚合酶1.0 U，Mg2+濃度1.5 mmol·L-1；最佳的RSAP-PCR25μl反應(yīng)體系為：10×buffer2.5μl，dNTPs濃度300μmol·L-1，模板DNA25 ng，Taq DNA聚合酶濃度2.0 U，引物濃度0.4μmol·L-1，Mg2+濃度2.5 mmol·L-1。
　　2.分別從153對(duì)

3、SRAP引物和45對(duì)RSAP引物中篩選出了12對(duì)和9對(duì)多態(tài)性高、重復(fù)性好的引物，12對(duì)SRAP引物共擴(kuò)增DNA譜帶215條，其中多態(tài)性譜帶203條，多態(tài)率為94.5％，平均每對(duì)引物擴(kuò)增17.6條帶；9對(duì)RSAP引物共擴(kuò)增DNA譜帶154條，其中多態(tài)性譜帶141條，多態(tài)率為90.8%，平均每對(duì)引物擴(kuò)增17.1條帶。說(shuō)明SRAP和RSAP標(biāo)記均適用于樺褐孔菌的遺傳多樣性分析。
　　3.利用SRAP和RSAP分子標(biāo)記計(jì)算得出的20個(gè)樺褐