CUL4B與TCF-4的表達(dá)與膠質(zhì)瘤分級相關(guān)性研究.pdf

1、目的:
　　腦膠質(zhì)瘤起源于腦神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞，是中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的原發(fā)性惡性腫瘤，占顱內(nèi)腫瘤的40％～50％，通常呈浸潤性生長，無完整的包膜，手術(shù)不易完全切除。目前，治療以手術(shù)為主，可肉眼全切或大部切除，術(shù)后配合放射治療或化學(xué)治療，但總體療效不佳，術(shù)后復(fù)發(fā)快、預(yù)后差，嚴(yán)重影響人類的生命和健康，是神經(jīng)外科治療中相對棘手的難治性腫瘤之一。因此，尋求有效的治療措施刻不容緩，而想達(dá)到這一目的，首先必須解決的問題是明確膠質(zhì)瘤的發(fā)病機(jī)制。深入研

2、究膠質(zhì)瘤發(fā)生、發(fā)展的分子機(jī)制可能為臨床膠質(zhì)瘤的治療提供新方法。本研究通過對CUL4B和TCF-4表達(dá)與人膠質(zhì)瘤病理學(xué)特點和分級進(jìn)行研究，評估CUL4B和TCF-4與膠質(zhì)瘤病理學(xué)級別的關(guān)系，并探討其在膠質(zhì)瘤發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　方法:
　　標(biāo)本:取自中國醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院神經(jīng)外科2012年1月-2013年9月手術(shù)切除的腦膠質(zhì)瘤標(biāo)本49例，其中男20例，女29例;年齡15-72歲，所有病例術(shù)前未行放化療。標(biāo)本用10％中性甲醛

3、固定，常規(guī)石蠟包埋，2.5μm連續(xù)切片，并作HE染色確定診斷Ⅰ級9例，Ⅱ級12例，Ⅲ級17例，Ⅸ級11例。
　　主要試劑:CUL4B兔抗人單克隆抗體購自北京博奧森公司，TCF-4兔抗人單克隆抗體。SP染色試劑盒和DAB試劑盒均購自北京博奧森公司。
　　實驗方法和結(jié)果判定:應(yīng)用免疫組化SP法檢測人腦膠質(zhì)瘤中CUL4B和TCF-4表達(dá)情況，取一組行HE染色并校對膠質(zhì)瘤病理級別，再行SP免疫組化法檢測CUL4B及TCF-4以細(xì)胞核

4、和細(xì)胞質(zhì)中出現(xiàn)棕褐色顆粒或均一棕色定義為免疫組化陽性。對于每張切片隨機(jī)選擇10個高倍視野(×400)每個視野陽性≥5個，即為陽性。陽性程度分級，無陽性細(xì)胞計為（-），陽性細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)≤30％為(+)，陽性細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)30％-50％為(++)，陽性細(xì)胞占細(xì)胞總數(shù)≥50％為(+++)。
　　統(tǒng)計分析:把膠質(zhì)瘤Ⅰ和Ⅱ級合并為低級別組，把膠質(zhì)瘤Ⅲ和Ⅸ級合并為高級別組，采用X2檢驗計算低級別組與高級別組之間的差異，再以等級資料的相關(guān)分析

5、計算X2值來分析CUL4B及TCF-4二者的相關(guān)性，檢驗水準(zhǔn):a=0.05。
　　結(jié)果:
　　TCF-4:TCF-4蛋白陽性產(chǎn)物主要位于瘤細(xì)胞胞質(zhì)，呈棕褐色顆粒，49例TCF-4蛋白陽性表達(dá)率為61.23％(30/49)，低級別腦膠質(zhì)瘤（Ⅰ級+Ⅱ級）TCF-4蛋白陽性表達(dá)率為28.57％(6/21)，高級別腦膠質(zhì)瘤(Ⅲ級+Ⅸ級)TCF-4蛋白陽性表達(dá)率85.71％(24/28)，低級別膠質(zhì)瘤（Ⅰ級+Ⅱ級）與高級別膠質(zhì)瘤(Ⅲ級

6、+Ⅸ級)差異具有顯著性(P＜0.05)。
　　CUL4B:CUL4B蛋白陽性產(chǎn)物主要位于瘤細(xì)胞胞質(zhì)，呈棕褐色顆粒，49例CUL4B蛋白陽性表達(dá)率為55.12％(27/49)，低級別腦膠質(zhì)瘤（Ⅰ級+Ⅱ級）CUL4B蛋白陽性表達(dá)率為33.33％(7/21)，高級別腦膠質(zhì)瘤(Ⅲ級+Ⅸ級)CUL4B蛋白陽性表達(dá)率為71.43％(20/28)，低級別腦膠質(zhì)瘤（Ⅰ級+Ⅱ級）與高級別腦膠質(zhì)瘤(Ⅲ級+Ⅸ級)差異具有顯著性(P＜0.05)。CUL4