常用烤瓷合金對(duì)細(xì)胞凋亡信號(hào)分子基因表達(dá)與蛋白表達(dá)的影響.pdf

1、目的:研究鎳鉻,鈷鉻,純鈦,鈀基,金鉑5種常用烤瓷合金對(duì)小鼠肺成纖維細(xì)胞(L929)細(xì)胞凋亡信號(hào)分子基因表達(dá)水平與蛋白表達(dá)水平的影響。
　　方法:(1)鎳鉻,鈷鉻,純鈦,鈀基,金鉑5種烤瓷合金分別經(jīng)過1次熔鑄,獲得片狀試件并分別使用DMEM細(xì)胞培養(yǎng)液進(jìn)行浸提72小時(shí)后獲得上述5種烤瓷合金試件的浸提液;(2)Real-timeqPCR檢測上述5種烤瓷合金浸提液培養(yǎng)L929細(xì)胞48小時(shí)后各合金組以及陰性對(duì)照組細(xì)胞胞質(zhì)中Caspase-

2、3、Caspase-8、Caspase-9、細(xì)胞色素C、Bax,Bcl-2、Fas、Fasl等信號(hào)分子的mRNA表達(dá)水平的變化;(3)Westernblot檢測上述5種烤瓷合金測試試件的浸提液培養(yǎng)L929細(xì)胞48小時(shí)后各合金組以及陰性對(duì)照組細(xì)胞胞質(zhì)中Caspase-3和Caspase-9蛋白表達(dá)水平的變化。
　　結(jié)果:(1)經(jīng)過Real-timeqPCR檢測發(fā)現(xiàn):金鉑合金組和鈀基合金組Bcl-2的mRNA的相對(duì)表達(dá)量大于陰性對(duì)照組

3、(P<0.05);鎳鉻合金組Bax的mRNA相對(duì)表達(dá)量大于陰性對(duì)照組(P<0.05);鎳鉻合金組與純鈦合金組Caspase-9和Caspase-3的mRNA的相對(duì)表達(dá)量大于陰性對(duì)照組(P<0.05);5種烤瓷合金組Caspase-8的mRNA相對(duì)表達(dá)量均小于陰性對(duì)照組(P<0.05);金鉑合金組細(xì)胞色素C的mRNA相對(duì)表達(dá)量小于陰性對(duì)照組(P<0.05);其他4個(gè)合金組細(xì)胞色素C的mRNA相對(duì)表達(dá)量均大于陰性對(duì)照組(P<0.05);鎳鉻

4、合金組、鈀基合金組、金鉑合金組和鈷鉻合金組Fas的mRNA相對(duì)表達(dá)量大于陰性對(duì)照組(P<0.05);鎳鉻合金組、鈀基合金組和鈷鉻合金組Fasl的mRNA相對(duì)表達(dá)量大于陰性對(duì)照組(P<0.05)。
　　(2)經(jīng)過Westernblot檢測發(fā)現(xiàn):5種烤瓷合金組的Caspase-9蛋白的表達(dá)均高于陰性對(duì)照組(P<0.05);金鉑合金組、鈀基合金組、純鈦合金組以及鈷鉻合金組的L929細(xì)胞胞質(zhì)中Caspase-3蛋白的表達(dá)高于陰性對(duì)照組(P

5、<0.05);鎳鉻合金組的L929細(xì)胞胞質(zhì)中Caspase-3蛋白的表達(dá)低于陰性對(duì)照組(P<0.05)。
　　結(jié)論:(1)不同烤瓷合金在細(xì)胞培養(yǎng)液中析出的不同離子將會(huì)對(duì)細(xì)胞凋亡相關(guān)信號(hào)分子的mRNA和蛋白表達(dá)產(chǎn)生不同程度的影響;(2)鎳鉻、鈷鉻、純鈦、鈀基和金鉑等5種常用烤瓷合金可能不通過外源性信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;(3)鎳鉻、鈷鉻、純鈦、鈀基和金鉑等5種常用烤瓷合金可能通過內(nèi)源性信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡;(4)金鉑合金和鈀基