淄博地區(qū)豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌的分離鑒定及免疫預(yù)防研究.pdf

1、豬傳染性胸膜肺炎(Porcine Pleuropneumonia)是由胸膜肺炎放線桿菌(Actinobacillus Pleuropneumoniae,APP)引起的一種常見(jiàn)的呼吸道傳染病,各年齡的豬只均可感染。豬群感染胸膜肺炎放線桿菌后,當(dāng)遇到氣候環(huán)境突變,通風(fēng)不良等應(yīng)激因素時(shí),豬只抵抗力下降,可誘發(fā)本病,主要表現(xiàn)為精神沉郁,體溫升高,呼吸困難等臨床癥狀,并出現(xiàn)特征性的出血性肺炎和胸膜炎。本病在世界各養(yǎng)豬國(guó)家普遍存在,近年來(lái),流行日趨

2、嚴(yán)重,成為大規(guī)模養(yǎng)豬的五大疫病之一。本研究共分為二部分： 第一部分：豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌的分離鑒定 本實(shí)驗(yàn)對(duì)分離自淄博市不同地區(qū)的疑似胸膜肺炎放線桿菌進(jìn)行分離培養(yǎng)、生化鑒定、PCR鑒定、藥敏試驗(yàn)、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)等研究。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)該分離菌中有20株細(xì)菌為多形態(tài)、革蘭氏陰性桿菌；生化實(shí)驗(yàn)和PCR擴(kuò)增鑒定結(jié)果表明所分離的上述20株菌株為豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌。對(duì)確診的20株胸膜肺炎放線桿菌進(jìn)行血清型鑒定,結(jié)果發(fā)現(xiàn)在淄博地區(qū)流

3、行的胸膜肺炎放線桿菌主要為血清5型和血清7型。其中,血清5型13株、血清7型7株,血清5型為相對(duì)優(yōu)勢(shì)的血清型。 第二部分豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌油乳劑二價(jià)滅活疫苗的制備及小鼠免疫保護(hù)試驗(yàn) 根據(jù)淄博地區(qū)豬傳染性胸膜肺炎放線桿菌的流行情況,制備了血清5型、7型二價(jià)滅活疫苗。以該疫苗免疫小白鼠,進(jìn)行同源攻毒保護(hù)試驗(yàn),結(jié)果該疫苗在0.6ml/只的免疫劑量下可對(duì)小白鼠產(chǎn)生較強(qiáng)的保護(hù)作用,用同血清型菌株對(duì)免疫后的小白鼠攻毒,僅表現(xiàn)肺

4、臟輕微出血,無(wú)死亡,而對(duì)照組未經(jīng)免疫直接攻毒的小白鼠全部死亡,肺臟嚴(yán)重出血；小白鼠免疫后第5d就可以檢測(cè)到抗體,并且抗體水平上升較快,到第15d抗體達(dá)到最高水平,之后,抗體水平開(kāi)始下降,但下降幅度不大,可持續(xù)1個(gè)月左右；用自制的疫苗和市場(chǎng)上購(gòu)買的疫苗同時(shí)對(duì)仔豬進(jìn)行同源攻毒保護(hù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)照組表現(xiàn)明顯的胸膜肺炎癥狀、肺臟嚴(yán)重出血且有兩頭死亡；市場(chǎng)上購(gòu)買的疫苗免疫組出現(xiàn)出現(xiàn)明顯的厭食、喘氣、呼吸困難等急性胸膜肺炎癥狀；自制疫苗免疫組只有一頭出