辛伐他汀對(duì)糖尿病大鼠頸動(dòng)脈的保護(hù)作用.pdf

1、目的：觀察辛伐他汀干預(yù)前后糖尿病大鼠頸動(dòng)脈中P-選擇素、MMP-2的表達(dá)變化，探討其對(duì)糖尿病大鼠頸動(dòng)脈的保護(hù)作用。
　　 方法：選用54只8周齡230g～260g的清潔型雄性Wistar大鼠，隨機(jī)分為3組：Ⅰ.正常對(duì)照組(A組，n=18)；Ⅱ.糖尿病組(B組，n=18)；Ⅲ.辛伐他汀干預(yù)組(C組，n=18).禁食12小時(shí)后，分別給予糖尿病組、辛伐他汀干預(yù)組大鼠鏈尿佐菌素(STZ)55mg/kg，溶于PH4.3，0.1mmol/L

2、的枸櫞酸緩沖液一次性腹腔注射，對(duì)照組大鼠予以等體積枸櫞酸緩沖液注射。72h后以連續(xù)三次隨機(jī)血糖≥16.7mmol/L為糖尿病模型造模成功。成模1周后給予藥物干預(yù)，辛伐他汀干預(yù)組給予10mg/kg/d辛伐他汀生理鹽水混懸液灌胃，對(duì)照組和糖尿病組大鼠給予等體積生理鹽水灌胃。共喂養(yǎng)12周，每周測(cè)體重1次，每2周測(cè)血糖1次。分別于實(shí)驗(yàn)的4、8、12周時(shí)各取6只大鼠，清晨空腹腔靜脈采血，分離血清測(cè)定各項(xiàng)生化指標(biāo)。切取頸動(dòng)脈組織一部分固定、包埋、制

3、備病理切片，鏡下觀察頸動(dòng)脈組織結(jié)構(gòu)形態(tài)學(xué)改變。分別用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)及免疫組化法測(cè)定大鼠4、8、12周時(shí)血清及頸動(dòng)脈組織中P-選擇素、MMP-2定量和定位表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1)A組大鼠精神狀態(tài)良好、被毛光潔、生長(zhǎng)發(fā)育正常。B組和C組大鼠全部成模，在實(shí)驗(yàn)期間均表現(xiàn)出多飲、多食、多尿、消瘦、生長(zhǎng)遲緩、精神萎糜、反應(yīng)遲鈍、毛發(fā)豎立無(wú)光澤、蜷臥拱背等癥狀。
　　 2)注射STZ72小時(shí)后，B、C組大

4、鼠空腹血糖顯著高于A組(P＜0.05)；B、C兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。B組、C組空腹胰島素較A組明顯降低(P＜0.05)；B、C兩組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 3)與A組比較，B組、C組TC、TG、LDL-C水平逐漸增高，HDL-C逐漸降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；與B組比較，C組TC、TG、LDL-C有所降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而HDL-C升高無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05

5、)。
　　 4)B組、C組血清P-選擇素、MMP-2水平較A組顯著升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)；與B組比較，C組血清P-選擇素、MMP-2水平則降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 5)與A組比較，隨著病程的延長(zhǎng)，于實(shí)驗(yàn)的8周、12周時(shí)，B組、C組頸動(dòng)脈內(nèi)中膜厚度明顯增加，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；C組IMT較B組明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 6)光鏡下觀察：A組

6、大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞和中膜平滑肌細(xì)胞排列規(guī)則，結(jié)構(gòu)完整，內(nèi)膜中膜的彈性層連貫，頸動(dòng)脈厚度增加不明顯；B組在4周時(shí)頸動(dòng)脈內(nèi)膜內(nèi)皮細(xì)胞規(guī)則，中膜輕度平滑肌增生，隨著病程的延長(zhǎng)，在8、12周時(shí)內(nèi)皮細(xì)胞排列逐漸紊亂，中膜平滑肌細(xì)胞明顯增生，甚至出現(xiàn)泡沫細(xì)胞，導(dǎo)致頸動(dòng)脈管壁顯著增厚，管腔狹窄；C組隨著干預(yù)時(shí)間的延長(zhǎng)，上述改變逐漸改善。
　　 7)免疫組化結(jié)果：A組大鼠頸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞和平滑肌細(xì)胞均有少量P-選擇素、MMP-2表達(dá)，與A組比較，

7、B組、C組P-選擇素、MMP-2表達(dá)增高，且隨著病程延長(zhǎng)增加更為明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；與B組比較，C組P-選擇素、MMP-2表達(dá)降低，且隨著時(shí)間延長(zhǎng)其降低更為明顯，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，
　　 結(jié)論：在糖尿病大鼠大血管病變的早期，血清及頸動(dòng)脈組織中即已存在P-選擇素、MMP-2的表達(dá)，隨著病程的延長(zhǎng)，表達(dá)水平愈顯著，且P-選擇素、MMP-2的表達(dá)均與IMT厚度呈正相關(guān)；而辛伐他汀可通過(guò)影響P-選擇素、MMP