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文檔簡介
1、目的
本研究探討雌二醇(estradiol,E2),孕酮(progesterone,P)對MA891乳腺癌細胞侵襲和遷移能力影響,以及對MA891乳腺癌細胞表達FGF1、FGFR1、MMP2和MMP9表達的影響,從而初步分析MA891乳腺癌細胞侵襲及遷移的機制。
方法
1.從荷瘤TA2小鼠取出腫瘤組織,原代培養(yǎng)TA2小鼠自發(fā)性乳腺癌MA891細胞(TA2MA891),待穩(wěn)定傳代后建立起MA891乳腺癌細胞系
2、。將MA891乳腺癌細胞接種于正常TA2小鼠皮下,觀察腫瘤生長情況。
2.劃痕實驗及Transwell小室法檢測E2、P二者單獨及聯(lián)合作用對MA891乳腺癌細胞侵襲和遷移的影響。
3.細胞免疫組化觀察MA891乳腺癌細胞在E2、P二者單獨及聯(lián)合作用下FGF1、FGFR1、MMP2、MMP9表達。
4.運用Image-ProPlus6.0圖像分析軟件進行免疫組化圖片光密度分析,以平均光密度(averageop
3、tical,AOD)值代表免疫組化染色的強度作為觀察指標。運用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包處理數(shù)據(jù)結(jié)果。數(shù)據(jù)結(jié)果采用單因素方差分析(onewayANOVA),進一步用LSD法進行多組間比較。P<0.05時認為差異有統(tǒng)計學意義。
結(jié)果:
1.皮下接種MA891乳腺癌細胞的10只小鼠,均在接種后18天內(nèi)出現(xiàn)明顯腫瘤生長。
2.E2、P及二者聯(lián)合對MA891乳腺癌細胞遷移侵襲的影響。
劃痕實驗和Trans
4、well小室法檢測顯示,E2、P能使MA891細胞遷移和侵襲能力產(chǎn)生顯著影響,通過人工基底膜的MA891乳腺癌細胞數(shù)量較對照組明顯增加(P<0.01)。
E2增加MA891細胞遷移和侵襲能力(P<0.01,P<0.05)。
P增加MA891細胞遷移和侵襲能力(P<0.01,P<0.05)。
E2+P共同作用下MA891細胞遷移和侵襲能力較單純E2及單純P作用下高(P<0.05)。
4.E2、P及二
5、者聯(lián)合對MA891乳腺癌細胞表達FGF1、FGFR1、MMP2、MMP9的影響。細胞免疫組化顯示:E2能使MA891乳腺癌細胞表達FGF1、FGFR1、MMP2、MMP9上調(diào)。較正常對照組差異對均有統(tǒng)計學意義(P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.05)。
P能使MA891乳腺癌細胞表達FGF1、FGFR1、MMP2、MMP9上調(diào)。較正常對照組差異對均有統(tǒng)計學意義(P<0.05,P<0.05,P<0.05,P<0.
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