siRNA-survivin納米脂質體(CL01-si-survivin)藥代動力學研究.pdf

1、背景:survivin基因在腫瘤細胞中過表達，正常組織不表達或極少量表達。survivin基因具有促進腫瘤生長以及抑制凋亡作用。本課題前期研究已經(jīng)證實siRNA-survivin納米脂質體在體外及小鼠體內(nèi)的抗腫瘤活性。survivin基因作為靶點可應用于腫瘤的基因治療。
　　目的:通過研究siRNA-survivin納米脂質體（CL01-si-survivin）的藥代動力學參數(shù)，為CL01-si-survivin生物安全性評價提供

2、重要依據(jù)。
　　方法:BALB/C小鼠24只（8周齡），雄性。隨機分為6組，每組n=4只。根據(jù)小鼠體重靜脈注射不同濃度CL01-si-survivin（1mg/kg，3mg/kg，6mg/kg），給藥后，眼眶靜脈采血。采血時間點分別為5min，15min，30min，45min，1h，1.5h，2h，3h，4h，4h，6h，7h，24h，30h，48h.各時間點采集樣本0.1ml血樣經(jīng)過離心、-800C保存血漿。建立系列濃度標準工

3、作液及藥物體系濃度，加入待測血漿采用q-RT-PCR方法檢測CL01-si-survivin血漿中藥物濃度。應用SPSS17.0軟件分析CL01-si-survivin血漿濃度參數(shù)，研究其藥代學特點。
　　結果:（1）標準曲線制作:建立體系終濃度為1.0E+06 pg/ml、1.0E+0.5 pg/ml、1.0E+4pg/ml、1.0E+3 pg/ml、1.0E+2pg/ml的標準檢測體系，加入待測血漿進行檢測。以血漿藥物濃度對數(shù)

4、為自變量，各濃度水平的平均Ct值為因變量，線性回歸方程提示，各批次的血漿中的CL01-si-survivin濃度與給藥濃度水平呈正相關(0.5＜r＜1)，呈線性關系。
　　(2)血藥濃度:低劑量組（1mg.kg）、中劑量組(3 mg/kg)、高劑量(6mg/kg)組，血漿藥物濃度的峰值均為注藥后15min，分別達到1042538.00pg/ml，6837099.54 pg/ml，14631333.15 pg/ml。給藥后24hr血

5、漿藥物濃度明顯降低，三組分別為22.04，44.18，258.36pg/ml。
　　(3)藥物半衰期(t1/2):低、中、高劑量組分別為3.60hr，2.64hr，2.80hr;三組劑量藥時曲線下面積(AUC)分別952190.88（hr* pg/ml）、6800687.79（hr* pg/ml）、13803680.96（hr* pg/ml）。藥物總清除率(CL):1050.12（ml/hr/kg）、441.13(ml/hr/kg

6、)、434.67(ml/hr/kg)。
　　結論:
　　(1)三個劑量的消除半衰期t1/2相接近，均在2-4hr之間。
　　(2)血藥濃度達峰時間Tmax三組均相同，在15min后達峰值。
　　(3)最大血藥濃度Cmax隨著劑量增大而增大，在劑量1-6mg/kg之間正相關關系。
　　(4)藥時曲線下面積AUC隨著劑量增大而增大，在劑量1-6mg/kg之間正相關關系。
　　(5)三組體內(nèi)駐留時間MRT接