兩面針內生活性菌株Y118的初步研究.pdf

1、目的:由于植物內生真菌與宿主植物特殊的生存關系，使其能夠產(chǎn)生與宿主植物相同或形似的化學成分。本課題以廣西產(chǎn)兩面針Zanthoxylum nitidum(Rox.)DC.原植物分離出的活性內生菌株Y118為研究對象，并對其次生代謝產(chǎn)物的生物活性進行研究。旨在為藥用植物兩面針的資源保護與開發(fā)提供實驗依據(jù)。
　　方法:通過形態(tài)學和分子生物學方法對Y118菌株進行鑒定;通過單因素考察來研究各條件對菌株發(fā)酵的影響;采用提取法獲得Y118菌株

2、次生代謝的粗提物，并通過抑菌圈法和3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑溴鹽(MTT法)研究其抗菌抗腫瘤作用，同時利用硅膠柱色譜，大孔樹脂吸附色譜，葡聚糖凝膠色譜，重結晶等分離方法對其次生代謝的粗提物的活性部位進行分離和純化，并通過質譜，氫譜和碳譜等波譜技術解析化合物結構。
　　結果:經(jīng)鑒定，菌株Y118可能為半知菌亞門擬莖點霉屬真菌;以發(fā)酵菌絲干重為考察對象，結果表明燕麥片為碳源，牛肉膏為氮源，PH=7，溫度25℃

3、、培養(yǎng)時間7天、接種量10塊/瓶、裝液量250ml/瓶、搖床轉速120r/min時，菌絲干重數(shù)值最大。菌株發(fā)酵代謝產(chǎn)物的提取物和發(fā)酵液，均對病原菌有不同的抑制作用，其中以發(fā)酵液的抑菌作用最明顯且廣譜。當濃度為80ug/ml時，Y118菌株的發(fā)酵代謝產(chǎn)物的甲醇提取物，丙酮提取物和乙酸乙酯提取物均對肝癌HepG2細胞有抑制作用;菌株的發(fā)酵液對肝癌HepG2細胞具明顯的抑制作用。從菌株發(fā)酵代謝產(chǎn)物的提取物的活性部位和發(fā)酵液中分離出15個單體化