缺血預(yù)處理對(duì)體外循環(huán)肺損傷的保護(hù)作用及機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:通過(guò)觀察肺缺血預(yù)處理(Ischemic preconditioning，IP)對(duì)犬體外循環(huán)肺缺血再灌注后的保護(hù)作用及水通道蛋白1(AQP1)的表達(dá)，來(lái)探討CPB肺損傷的機(jī)制。
　　 方法:實(shí)驗(yàn)用健康雜種犬12只，雌雄不限。隨機(jī)分為兩組，對(duì)照組（C組，n=6）和缺血預(yù)處理組（Y組，n＝6）。兩組動(dòng)物均腹腔注射戊巴比妥鈉(25 mg·kg-1)麻醉固定后行氣管插管，股動(dòng)、靜脈置管監(jiān)測(cè)中心靜脈壓(CVP)、平均動(dòng)脈壓(MAP)，

2、開(kāi)胸后分離左、右肺動(dòng)脈并建立犬體外循環(huán)模型。C組在左肺行缺血再灌注，Y組在阻斷左肺動(dòng)脈前進(jìn)行肺缺血預(yù)處理。于體外循環(huán)管道建立后轉(zhuǎn)機(jī)前(T1)、阻斷左肺動(dòng)脈前(T2)停機(jī)時(shí)(T3)、停機(jī)后2h(T4)取肺組織及動(dòng)脈血，行動(dòng)脈血?dú)夥治鲇?jì)算呼吸指數(shù)(RI)和氧合指數(shù)(OI)，開(kāi)放左肺動(dòng)脈行再灌注2.5h后，左肺及右肺肺功能變化比例的計(jì)算。取肺組織用Western-blot技術(shù)檢測(cè)AQP1蛋白質(zhì)表達(dá)，光鏡下觀察肺組織病理學(xué)變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)束前分別對(duì)

3、左右肺灌注5％的小牛血清蛋白檢查肺水通透性。
　　 結(jié)果:(1)呼吸功能參數(shù)變化:兩組體外循環(huán)前T1時(shí)點(diǎn)P(A-α)O2、RI和OI無(wú)明顯變化(P＞0.05)。組內(nèi)比較:與T1時(shí)點(diǎn)比較，兩組T3、T4時(shí)點(diǎn)P(A-a) O2和RI逐漸升高，OI逐漸降低(P＜0.05);組間比較:與對(duì)照組相比，預(yù)處理組T3、T4時(shí)點(diǎn)P(A-a)、O2和RI明顯低于對(duì)照組，OI則相反(P＜0.05)。
　　 (2)肺組織AQP1蛋白質(zhì)表達(dá)的變

4、化:兩組犬體外循環(huán)前肺組織AQP1蛋白質(zhì)表達(dá)量均無(wú)明顯差異(P＞0.05)。組內(nèi)比較:兩組CPB后各時(shí)間點(diǎn)較CPB前AQP1蛋白質(zhì)表達(dá)量逐漸下降(P＜0.05)。組間比較:與對(duì)照組相比，預(yù)處理組T3、T4時(shí)點(diǎn)AQP1蛋白質(zhì)表達(dá)量明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)。
　　 (3)肺泡液體清除率:停機(jī)2h后，與對(duì)照組比較，預(yù)處理組肺泡液體清除率明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)。
　　 (4)肺濕質(zhì)量/干質(zhì)量比測(cè)定:兩組犬阻斷左肺動(dòng)

5、脈前T1、T2時(shí)點(diǎn)肺組織肺濕/干比值均無(wú)明顯差異（＞0.05）。組內(nèi)比較:與T1時(shí)點(diǎn)比較，兩組T3、T4時(shí)點(diǎn)濕/干比逐漸上升（P＜0.05）。組間比較:與對(duì)照組相比，預(yù)處理組T3、T4時(shí)點(diǎn)濕/干比明顯低于對(duì)照組（P＜0.05）。
　　 (5)肺功能變化比例:左肺動(dòng)脈再灌注2.5小時(shí)后與基礎(chǔ)值比較。組間比較:預(yù)處理組肺順應(yīng)性、氧合指數(shù)及呼吸指數(shù)的惡化程度明顯較對(duì)照組低（P＜0.05）;對(duì)照組左肺順應(yīng)性、氧合指數(shù)及呼吸指數(shù)的惡化程度

6、較對(duì)照組右肺明顯增高（P＜0.05）。
　　 (6)肺組織光鏡下病理改變及病理評(píng)分:光鏡學(xué)結(jié)果:兩組實(shí)驗(yàn)犬CPB前肺組織結(jié)構(gòu)清晰，肺泡腔內(nèi)未見(jiàn)填充物、間隔無(wú)明顯增寬;CPB后，肺泡毛細(xì)血管擴(kuò)張，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)增加，肺泡腔見(jiàn)水腫液;T3、T4時(shí)點(diǎn)肺組織結(jié)紊亂，肺泡壁部分?jǐn)嗔选㈤g隔逐漸增寬、毛細(xì)血管擴(kuò)張明顯，局部肺泡腔塌陷，肺泡腔見(jiàn)水腫液及紅細(xì)胞。病理切片評(píng)分:兩組犬阻斷左肺動(dòng)脈前T1、T2時(shí)點(diǎn)肺組織病理評(píng)分無(wú)明顯差異（P＞0.05）

7、。組內(nèi)比較:與T1時(shí)點(diǎn)比較，兩組T3、T4時(shí)點(diǎn)病理評(píng)分逐漸增高(P＜0.05);組間比較:與對(duì)照組相比，預(yù)處理組T3、T4時(shí)點(diǎn)病理評(píng)分明顯低于對(duì)照組（P＜0.05）。
　　 結(jié)論:(1)缺血預(yù)處理可降低CPB犬呼吸指數(shù)，提高其氧合指數(shù)、肺的動(dòng)態(tài)順應(yīng)性。改善犬的肺功能，減輕犬肺缺血/再灌注損傷，對(duì)犬CPB肺有一定的保護(hù)作用。(2)CPB導(dǎo)致肺損傷時(shí)，肺AQP1表達(dá)下降;缺血預(yù)處理可使肺AQP1表達(dá)增加，提高肺泡液體清除率，AQP1