高糖誘導(dǎo)的足細(xì)胞損傷中ROS上調(diào)TRPC6的表達(dá)及其機(jī)制研究.pdf

1、研究表明，糖尿病腎?。╠iabetic nephropathy，DN）是Ⅰ型和Ⅱ型糖尿病發(fā)病的關(guān)鍵性并發(fā)癥之一。同時(shí)，它是導(dǎo)致Ⅰ型糖尿病患者病發(fā)死亡的首要原因。目前，對(duì)于糖尿病腎病(DN)的分析研究已經(jīng)成為治療糖尿病的主要方向?，F(xiàn)在已經(jīng)了解到，DN的發(fā)生發(fā)展過(guò)程與腎小球足細(xì)胞的病變密切相關(guān)。足細(xì)胞的病變損傷會(huì)最終導(dǎo)致DN向終末期腎臟疾病(end-stage renal disease，ESRD)的惡行轉(zhuǎn)化。所以，對(duì)足細(xì)胞在糖尿病腎病(D

2、N)進(jìn)程中發(fā)生的病變損傷機(jī)制的研究是治療糖尿病腎病(DN)的關(guān)鍵點(diǎn)。研究證明，糖尿病腎病(DN)的發(fā)病進(jìn)程中，足細(xì)胞病變損傷的分子機(jī)制主要有兩種:一種是經(jīng)典的氧化應(yīng)激反應(yīng)導(dǎo)致的損傷途徑;另一種是Wnt/TRPC6信號(hào)通路調(diào)控途徑。這兩種途徑都是導(dǎo)致足細(xì)胞病變的主要原因之一，但是，兩種途徑之間是否存在相互調(diào)控作用，或者兩者共同聯(lián)合調(diào)節(jié)足細(xì)胞損傷的發(fā)生過(guò)程等，這些依然還不了解。
　　本論文研究選擇一種重要的細(xì)胞膜離子通道蛋白TRPC6

3、，用它來(lái)作為研究高糖引起的足細(xì)胞損傷過(guò)程中的關(guān)鍵性指標(biāo)分子。因?yàn)榻鼛啄暄芯匡@示，TRPC6是一種非選擇性瞬時(shí)受體電位陽(yáng)離子通道蛋白(transient receptor potentialcationchannel6，TRPC6)，它的基因突變和表達(dá)量的異常會(huì)導(dǎo)致家族性局灶節(jié)段性腎小球硬化癥(focal segmental glomerulo sclerosis，F(xiàn)SGS)。同時(shí)，它可以作為糖尿病腎病(DN)進(jìn)程中足細(xì)胞病變損傷的標(biāo)志性

4、蛋白。我們同時(shí)選擇一種活性氧ROS清除劑N-MPG，檢測(cè)其在高糖誘導(dǎo)的足細(xì)胞損傷過(guò)程中對(duì)氧化應(yīng)激反應(yīng)的影響。同時(shí)，在高糖刺激損傷的足細(xì)胞中，我們加入N-MPG于細(xì)胞的培養(yǎng)基中，等待作用一定的時(shí)間后，檢測(cè)細(xì)胞中TRPC6蛋白的表達(dá)變化情況。
　　本論文實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果如下:
　　1、高糖能夠顯著的誘導(dǎo)足細(xì)胞的損傷，主要表現(xiàn)為細(xì)胞內(nèi)ROS大量增加，細(xì)胞發(fā)生凋亡和壞死，存活率明顯降低。
　　2、N-MPG能夠顯著緩解高糖對(duì)足細(xì)胞