鴨產(chǎn)ESBLs致病菌感染的治療新制劑研究.pdf

1、本課題旨在對(duì)鴨常見(jiàn)致病菌大腸桿菌、里默氏桿菌開(kāi)展超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)檢測(cè)及耐藥性調(diào)查，并研究解決產(chǎn)ESBLs菌株感染的有效藥物治療措施。2006年3月至2007年6月間，我實(shí)驗(yàn)室依據(jù)CLSI推薦的ESBLs表型初篩、確證的試驗(yàn)方法對(duì)對(duì)國(guó)內(nèi)7個(gè)省份臨床分離的鴨大腸桿菌32株、鴨里默氏桿菌16株進(jìn)行超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)檢測(cè)。并用二倍稀釋法(MIC值法)及K-B紙片法檢測(cè)臨床分離菌株的多種藥物敏感性，依據(jù)聯(lián)合用藥原則解

2、決鴨產(chǎn)ESBLs致病菌株的耐藥性，通過(guò)藥物敏感性篩選聯(lián)合用藥方案，初選后測(cè)定累積濃度抑菌曲線及聯(lián)合抗菌指數(shù)(FIC)進(jìn)行藥物增效研究，選擇對(duì)產(chǎn)ESBLs和非產(chǎn)ESBLs鴨致病菌敏感的聯(lián)合藥物組合并進(jìn)行藥物新制劑研究。 試驗(yàn)結(jié)果表明，通過(guò)實(shí)驗(yàn)室全自動(dòng)微生物鑒定系統(tǒng)(VTTEK-32)鑒定出32株鴨大腸桿菌，通過(guò)生化反應(yīng)鑒定出鴨里默氏桿菌16株，其中有7株鴨大腸桿菌產(chǎn)ESBLs，未檢測(cè)到產(chǎn)ESBLs鴨里默氏桿菌，大腸桿菌ESBLs陽(yáng)

3、性檢出率為21.87％。產(chǎn)ESBLs菌株對(duì)常用頭孢三代及半合成青霉素類(lèi)藥物的敏感率低于42.9％，對(duì)阿莫西林、氨芐西林耐藥率高達(dá)100％。產(chǎn)酶菌株和非產(chǎn)酶菌株對(duì)新型頭孢四代產(chǎn)品頭孢吡肟及碳青霉烯類(lèi)藥物亞胺培南、美羅培南的敏感率高于96％。加β-內(nèi)酰胺酶抑制劑的β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素復(fù)合制劑的敏感性普遍高于未加酶抑制劑的單方制劑，表明加酶抑制劑能夠部分解決此類(lèi)耐藥性問(wèn)題。 產(chǎn)ESBLs鴨大腸桿菌存在嚴(yán)重多重耐藥現(xiàn)象，主要表現(xiàn)為同時(shí)耐三

4、代頭孢、氨基糖苷類(lèi)、氟喹諾酮類(lèi)藥物，如耐頭孢曲松、頭孢噻肟、頭孢噻呋的產(chǎn)ESBLs菌株同時(shí)也對(duì)環(huán)丙沙星、恩諾沙星、慶大霉素、小諾米星、阿米卡星具有高耐藥性?？咕钚匝芯勘砻鳓?內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素與非β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素聯(lián)用能明顯提高FSBLs菌株對(duì)藥物的敏感性，聯(lián)用效果較為突出的是頭孢三代頭孢曲松聯(lián)用氟喹諾酮類(lèi)藥物加替沙星，二者2:1配比組合對(duì)產(chǎn)ESBLs菌株的敏感率高達(dá)85.7％，對(duì)非產(chǎn)ESBLs菌株敏感率則達(dá)92％；83.61％的非產(chǎn)ES

5、BLs菌株FIC<0.5，85.71％的產(chǎn)ESBLs菌株FIC<0.5，聯(lián)合用藥累積一濃度抑菌曲線百分率明顯左移，尤其是對(duì)產(chǎn)ESBLs菌株的左移明顯；聯(lián)合用藥組合對(duì)產(chǎn)ESBLs菌株的MIC50、MIC90比原藥分別降低3.25、3.4倍和1.11、3.33倍。表明此聯(lián)合用藥組合對(duì)產(chǎn)ESBLs菌株和非ESBLs菌株呈現(xiàn)高敏，可用于治療鴨產(chǎn)ESBLs菌株的臨床感染。 運(yùn)用β-CD藥物包合技術(shù)進(jìn)行新制劑研究目的是解決加替沙星原藥水溶性

6、低、適口性差和物理穩(wěn)定性差、光敏性高等應(yīng)用限制缺點(diǎn)。本課題采取飽合水溶液法(共沉淀法)制備OAT-β-CD包合物，運(yùn)用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化合包合工藝，并采取相溶溶解度法、掃描量熱法和X射線衍射法三種方法時(shí)行包合物驗(yàn)證：運(yùn)用直接溶解度測(cè)定法和穩(wěn)定性加速試驗(yàn)考察包合物的增溶效果和穩(wěn)定性改良情況。結(jié)果表明，OAT-β-CD包合物的最佳包合條件是OAT與B-CD分子比1:3、包合溫度為60℃、包合時(shí)間為60分鐘，包合率可高達(dá)80％左右；包合物中GA

7、T的溶解度明顯增加，平均比原藥增加13.44倍；加速試驗(yàn)3個(gè)月后包合物中GAT有效成份含量平均仍在82.72％以上，無(wú)明顯變色、結(jié)塊現(xiàn)象，而未包合的GAT有效成份含量平均僅在45.39％左右，下降了近50％，且有明顯變色、結(jié)塊現(xiàn)象。 結(jié)論：顯示產(chǎn)ESBLs鴨大腸桿菌存在多重耐藥現(xiàn)象，β-內(nèi)酰胺酶抑制劑能部分解決其對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的耐藥性，但不能解決多重耐藥現(xiàn)象，而聯(lián)合使用不同種抗生素是解決此類(lèi)多重耐藥現(xiàn)象的主要有效措施之一，