利用cDNA-AFLP分析甘蔗與黑穗病菌互作后的基因差異表達.pdf

1、甘蔗黑穗病是由黑粉菌引起的一種最主要的甘蔗真菌性病害，嚴重影響蔗莖產(chǎn)量和質(zhì)量?？购谒氩∮N一直是甘蔗育種的重要目標和當(dāng)前生產(chǎn)上急需解決的關(guān)鍵問題。為此，本研究以甘蔗高抗黑穗病品種NCo376為試驗材料，利用cDNA-AFLP和銀染技術(shù)，研究了黑穗病菌優(yōu)勢小種2脅迫下甘蔗基因的差異表達，獲得了136個差異表達片段，從中挑取40個差異片段，經(jīng)過克隆、測序和RT-PCR標記驗證后，篩選到37個誘導(dǎo)后差異表達的片段，其中31條為特異表達(誘導(dǎo)或

2、缺失)片段，6條為表達量差異(上調(diào)或下調(diào))的片段。在NCBI上進行blastx同源性分析顯示，34條差異表達基因序列可能在甘蔗與黑穗病菌互作響應(yīng)中起作用，其功能涉及細胞拯救與防御、細胞內(nèi)運輸、新陳代謝、核酸代謝、轉(zhuǎn)錄、蛋白合成與修飾及信號傳導(dǎo)等生物學(xué)過程；其余2條差異表達序列與玉米mRNA序列同源性高，達86％和80％，1條與甘蔗葉綠體DNA序列同源性高，達96％。此外，為了驗證差異表達基因的真實性，研究還選取其中3個差異表達基因(SU