siRNA干擾NBS1基因表達聯(lián)合順鉑對三陰性乳腺癌細胞MDa-MB-231增殖、凋亡和周期的影響.pdf

1、目的：探討siRNA敲低NBS1基因表達聯(lián)合順鉑對三陰性乳腺癌細胞MDA-MB-231增殖、凋亡和周期的影響。
　　方法：收集長海醫(yī)院和瑞金醫(yī)院2001年至2011年間收治的乳腺癌患者，共收集乳腺癌標本138例、正常癌旁乳腺組織97例，制作成組織芯片后，使用免疫組化方法明確NBS1蛋白在乳腺癌組織和癌旁正常組織中的表達情況。使用卡方檢驗比較乳腺癌組織組與癌旁組織組中NBS1蛋白陽性表達的比例。通過構建NBS1干擾質粒和陰性空載質粒

2、，并通過腺病毒載體感染三陰性乳腺癌MDA-MB-231細胞，蛋白印跡法明確NBS1基因表達受抑制情況;CCK-8法檢測干擾NBS1表達后順鉑對MDA-MB-231細胞體外增殖能力的影響;流式細胞法檢測感染后實驗組和陰性對照組MDA-MB-231細胞的凋亡和周期情況。
　　結果：免疫組化結果顯示，乳腺癌組織組和癌旁正常組織組的NBS1表達的陽性率分別是80.43％和15.46％，乳腺癌組織中NBS1的陽性表達率明顯高于癌旁組織，經(jīng)卡

3、方檢驗p＜0.05，兩者陽性率差異有統(tǒng)計學意義。蛋白印跡法檢測結果表明實驗組NBS1蛋白表達水平明顯低于陰性對照組和空白對照組(P＜0.05);CCK-8實驗結果提示，同時在順鉑的作用下，與陰性對照組和空白對照組相比，實驗組細胞增殖能力明顯受到抑制(P＜0.05);流式細胞儀檢測結果顯示，實驗組聯(lián)合順鉑與陰性對照組聯(lián)合順鉑相比凋亡率上升(P＜0.05);流式細胞儀測定周期結果顯示實驗組聯(lián)合順鉑乳腺癌細胞出現(xiàn)G1期蓄積以及細胞進入M期和G