腰果離體快繁體系建立的初步研究.pdf

1、腰果屬熱帶果樹，繁殖方式主要采用嫁接繁殖，種子實生苗用做砧木，種子是腰果主要的經濟價值所在，用種子作為種苗繁殖方式，無形提高了育種的成本。本試驗通過提高種子繁育的增殖系數，達到降低種苗成本的目的。本論文以組培的各個環(huán)節(jié)，包括外植體采集、表面滅菌、啟動、增殖、生根培養(yǎng)等，對腰果快速繁殖問題進行探索。試驗結果表明，腰果是組培繁殖比較困難的樹種，本文只是初步完成腰果快繁體系的建立。主要結果如下： 1.利用不同消毒劑濃度對腰果種子、大田

2、母樹采集的莖段進行不同時間的消毒試驗，根據污染率和發(fā)芽率等指標，得出以下結論：①大田采集的莖段、莖尖滅菌極易污染和褐變；②種子適宜的消毒液濃度和時間為：1mg/L多菌靈消毒30min，70％酒精消毒20min，0.15％升汞消毒45min；然后無菌水浸泡24h，再用0.15％升汞消毒20min。 2.以無菌苗去掉上、下胚軸的子葉節(jié)為外植體，通過不定芽的誘導，平均每個子葉節(jié)誘導出不定芽數為8.0個，然后離體生根，培育出腰果再生植株

3、。優(yōu)化出的各階段培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件為：(1)種子萌發(fā)：無菌水+無菌濾紙，在25±2℃(以下各階段的溫度均同)溫度范圍內，暗處培養(yǎng)2周，然后再光照2～3周，光照16h，1500LX；(2)不定芽誘導與增殖培養(yǎng)基：MS+1mg/L6-BA+30g/L蔗糖+8g/L瓊脂粉，光照16h，1500LX；(3)不定芽誘導生根：①先在1/2MS(液體)+25mg/LIBA+30g/L蔗糖中在暗處培養(yǎng)72h，②再用1/2MS+1mg/LIBA+1mg/L

4、IAA+3mg/LPP333+100mg/LVC+2g/L活性炭+30g/L蔗糖+8g/L瓊脂粉，或者1/2MS+1mg/LIBA+1mg/LIAA+5mg/L子葉汁+100mg/LVC+2g/L活性炭+30g/L蔗糖+8g/L瓊脂粉。 3.將無菌種子，去掉種殼，橫切子葉，取近軸端子葉為外植體，通過誘導不定芽，培育出腰果再生植株。優(yōu)化出的各階段培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件為：(1)外植體的獲得與不定芽誘導：消毒結束后，近軸端子葉用兩種方式進

5、行培養(yǎng)，①不留胚芽，②留胚芽，分別接種于MS+30g/L蔗糖+8g/L瓊脂粉的培養(yǎng)基中，暗處培養(yǎng)兩周后，在25±2℃(以下各階段的溫度均同)溫度范圍內，(2)不定芽增殖培養(yǎng)基：MS+5mg/L6-BA+30g/L蔗糖+8g/L瓊脂粉，光照16h，1500LX；(3)當不定芽長到2cm左右后，從近軸端子葉切下，然后單芽誘導生根，①先在1/2MS(液體)+25mg/LIBA+30g/L蔗糖中在暗處培養(yǎng)72h，②再用1/2MS+1mg/LIB

6、A+1mg/LIAA+3mg/LPP333+100mg/LVC+2g/L活性炭+30g/L蔗糖+8g/L瓊脂粉，1/2MS+1mg/LIBA+1mg/LIAA+5mg/L子葉汁+100mg/LVC+2g/L活性炭+30g/L蔗糖+8g/L瓊脂粉，生根率到達45％以上。 4.以無菌種子萌發(fā)獲得的種苗后，切下的含側芽的莖段為外植體，通過增殖方式獲得再生植株，優(yōu)化出各個階段最適宜培養(yǎng)基為：①莖尖伸長、莖段獲得腋芽的培養(yǎng)基為：MS+2m