異基因造血干細胞移植后急性移植物抗宿主病過程中T細胞趨化和遷移相關指標的表達研究.pdf

1、研究目的：急性移植物抗宿主病(aGVHD)是異基因造血干細胞移植(allo-HSCT)后的主要并發(fā)癥，效應細胞遷移到靶組織是發(fā)生aGVHD的必需環(huán)節(jié)。多種趨化因子受體、整合素β7、選擇素L、粘附分子CD11a/CD54與1磷酸鞘氨醇受體1(S1P1)可能在其中發(fā)揮作用。本研究的目的在于探索T細胞遷移在aGVHD中的作用機制，為臨床尋找具有早期預警、動態(tài)監(jiān)測及指導治療aGVHD的指標提供實驗依據(jù)，為尋找治療aGVHD的新方法提供實驗基礎。

2、 研究方法：本研究以allo-HSCT后受者造血重建后100天內(nèi)不同時期的血細胞為研究對象，通過流式細胞術監(jiān)測外周血淋巴細胞CCR7、CD45RA、CCR4、CCR9、CXCR3、CCR5及整合素β7、CD25、選擇素L、粘附分子CD11a/CD54的抗原表達情況，計算各指標百分比及絕對值。以磁分選方法純化CD4+T淋巴細胞，以實時定量PCR的方法檢測CD4純化細胞中S1P1及整合素β7的mRNA表達水平。收集臨床資料，根據(jù)臨床

3、診斷分為aGVHD及無aGVHD組，根據(jù)aGVHD發(fā)生部位分為單純皮膚組、單純腸道組、單純肝臟組、混合部位組，根據(jù)腹瀉原因分為腸道GVHD組、炎性腹瀉受者組及炎性腹瀉志愿者組，進行統(tǒng)計學分析。 研究結(jié)果： ①aGVHD組較無aGVHD組Tnaive、TCM百分比及絕對值升高，TEM、TTD百分比及絕對值下降，CCR7表達百分比及絕對值上調(diào)，CD8+細胞中CD8+CCR7+表達量明顯上升。兩組間T細胞、NK細胞、B細胞、C

4、D45RA及CD4+CCR7+/CD4+百分比及絕對值無顯著性差異。 ②aGVHD組較無aGVHD組間CCR4及其在CD4+與CD8+細胞中的表達百分比及絕對值、CCR9百分比、CCR5百分比及絕對值、CCR5在CD4+細胞及CD8+細胞中的表達百分比均顯著上升。aGVHD組與無aGVHD組間CXCR3百分比及絕對值均無統(tǒng)計學差異。 ③aGVHD組較無aGVHD組間整合素β7及其在CD4+與CD8+細胞中的表達百分比及絕

5、對值均顯著上升，且具有部位特異性，肝臟、腸道部位GVHD者較單純皮膚GVHD明顯升高。腸道GVHD組與炎性腹瀉受者組組間整合素β7表達百分比及絕對值及其在CD4+與CD8+細胞中的表達百分比均具有顯著性差異，腸道GVHD組＞炎性腹瀉志愿者組＞炎性腹瀉受者組。 ④aGVHD組較無aGVHD組間CD25及CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細胞百分比及絕對值均顯著上升。腸道GVHD組與炎性腹瀉受者組組間CD25百分比及絕對值、CD4+CD25

6、+調(diào)節(jié)性T細胞百分比、CD54百分比及其在CD8+細胞中的表達百分比絕對值顯著升高。兩組間CD11a及CD62L表達百分比及絕對值無統(tǒng)計學差異。 ⑤aGVHD組較無aGVHD組間S1P1及整合素β7的mRNA表達顯著性上調(diào)。 結(jié)論：allo-HSCT后aGVHD發(fā)生過程中T細胞中表達的CCR7、CCR4、CCR9、CCR5、整合素β7、CD25、CD54及S1P1均明顯上調(diào)。以上信號途徑可能成為預防和治療aGVHD的新靶