參麥注射液對缺血再灌注損傷兔肺細胞凋亡及Fas-Fasl基因表達的影響.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:
   探討Fas/Fasl介導的細胞凋亡通路和肺缺血再灌注損傷的關系及參麥注射液對細胞凋亡及Fas/Fasl基因表達的影響,為肺保護提供理論依據(jù)。
   方法:
   1.實驗分組:健康日本大耳白兔30只,隨機將實驗兔分為3組:(1)假手術對照組(C組10只),麻醉后左側(cè)開胸,左肺門游離后留置阻斷帶,觀察4h;(2)肺缺血-再灌注組(ischemia-reperfusion,I-R組10只),手術同C組,

2、結扎阻斷帶,阻斷肺門1h后開放再灌注3h;(3)參脈注射液組(SM組10只),于肺缺血前20分鐘耳緣靜脈注射參脈注射液15ml/kg,余同I-R組。
   2.采用兔單側(cè)原位缺血再灌注模型。
   3.實驗結束取部分左肺組織測濕/干重比(W/D);采用原位末端標記法檢測肺組織凋亡指數(shù)(AI);原位雜交測定肺組織Fas/Fasl的表達;光鏡、電鏡下觀察肺組織形態(tài)結構變化,并測定肺組織損傷組織學定量評價指標(IQA)。

3、>   結果:
   1.I-R組和SM組AI、W/D及IQA值明顯高于C組(P<0.05或P<0.01);SM組AI、W/D及IQA值顯著低于I-R組(P<0.05和P<0.01)。
   2.C組見少量細胞凋亡;IR組肺組織細胞AI明顯高于C組(P<0.01);SM組與IR組比較明顯下降(P<0.01)。凋亡細胞主要為肺泡上皮細胞和血管內(nèi)皮細胞。C組:肺組織肺內(nèi)未見明顯棕黃色陽性信號,即Fas-mRNA和FasL-

4、mRNA的表達不明顯;I-R組與SM組:Fas-mRNA和FasL-mRNA的表達明顯強于C組(P<0.01或P<0.05);SM組Fas-mRNA和FasL-mRNA的表達顯著弱于I-R組(均P<0.01)。陽性細胞主要分布于肺血管內(nèi)皮細胞、肺泡上皮細胞及細支氣管上皮細胞,間質(zhì)細胞也有少量表達。
   3.各參數(shù)間相關性分析:AI與Fas及FasL原位雜交吸光度值之間呈明顯正相關,相關系數(shù)r分別為0.8448和0.8148,P

5、均<0.01;AI與W/D及IQA值之間均呈顯著正相關,相關系數(shù)r分別為0.7625和0.7559,P均<0.01;W/D與Fas及FasL原位雜交吸光度值之間呈明顯的正相關,相關系數(shù)r分別為0.7458、和0.8245,P均<0.01;IQA與Fas及FasL原位雜交吸光度值之間均呈顯著正相關,相關系數(shù)r分別為0.8195及0.843,P均<0.01。
   4.光鏡檢查:C組肺間質(zhì)及肺泡較完整,未見炎癥細胞浸潤;I-R組肺不

6、張伴肺氣腫,肺間質(zhì)增寬并有水腫,炎癥細胞浸潤,肺泡內(nèi)有較多血液成分滲出,損傷明顯;SM組肺間質(zhì)輕度水腫,少量炎癥細胞浸潤,肺泡較完整。
   5.透射電鏡檢查:C組毛細血管內(nèi)皮細胞結構正常,連接緊密,基底膜完整,線粒體嵴清楚,板層小體數(shù)量未見改變,微絨毛完整。I-R組肺內(nèi)微小動脈內(nèi)皮細胞胞漿內(nèi)吞飲小泡增多,線粒體水腫甚至空泡化,內(nèi)膜下基底膜水腫、空泡變性,內(nèi)皮細胞懸空,毛細血管腔內(nèi)PMN堵塞,Ⅱ型上皮細胞線粒體腫脹,板層小體減少

7、。SM組肺微小動脈及毛細血管內(nèi)皮結構基本正常,連接緊密,基底膜基本完整,線粒體結構基本正常,少數(shù)有水腫,毛細血管內(nèi)PMN少,肺泡Ⅱ型上皮細胞形態(tài)結構無明顯異常,微絨毛無明顯脫落,線粒體腫脹不明顯,板層小體無明顯減少,肺泡間質(zhì)內(nèi)未見明顯的PMN浸潤。
   結論:1.肺組織Fas/Fasl介導的細胞凋亡通路可能在肺缺血再灌注損傷中起重要作用;
   2.缺血再灌注可使肺組織Fas/Fasl基因表達上調(diào),F(xiàn)as/Fasl基因

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