弓形蟲LDH-like MDH基因的克隆、表達、亞細胞定位和定點突變研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本研究首次克隆了T.gondiiMDH的DNA序列、cDNA序列，對cDNA推導(dǎo)翻譯出的氨基酸序列進行了一系列生物信息學(xué)分析，T.gondiiMDH確切命名應(yīng)為T.gondiiLDH-LikeMDH，進化上T.gondiiMDH所處位置衍生于α-原細菌或營光合作用細菌MDH的進化分支，與α-原細菌或營光合作用細菌MDH也隸屬LDH-LikeMDH相吻合。T.gondiiMDH在原核生物和真核細胞內(nèi)能分別進行有效的融合表達和非融合表達。間

2、接定位試驗表明T.gondiiMDH為胞漿定位。T.gondiiMDH-R89P突變體酶活性降低，Km值增大。T.gondiiMDH-H176L突變體酶活性幾乎為零。T.gondiiMDH與多數(shù)真核生物MDH尤其是和人各型MDH之間的異源性和低同源性(與人胞漿型MDH、線粒體型MDH、NADP+依賴型MDH的同源性分別為20.9％、25.9％、18.7％)，提示基于MDH作為藥靶篩選抗T.gondii藥具有可行性。另外本研究也為進一步深

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