藥物代謝酶基因熱點突變檢測芯片的研制與應用.pdf

1、細胞色素氧化酶P450(CYP450)是人體內(nèi)一類參與內(nèi)源性和外源性化合物代謝的重要代謝酶,代謝活化許多種藥物、前致癌物、前毒物和致突變劑.基因變異使CYP450s酶表現(xiàn)出遺傳多態(tài)性,并且具有明顯個體、種族或地域差異,這對藥物治療的個體反應和藥物毒副作用都產(chǎn)生重要影響.在CYP450酶系中,CYP450 1-3家族功能和性質的研究尤為引人關注.其中對藥物代謝十分重要的主要包括CYP 2C9,CYP 2C19,CYP 2D6和CYP 3A

2、4,而CYP 1A1,CYP 1A2,CYP 1B1,CYP 2E1和CYP 3A4對于致癌物的代謝活化是很重要的.基因分型技術是藥物基因組不研究的瓶頸.建立高通量、快速準確的基因分型技術是解決問題的關鍵.由于CYP450酶在人體藥物代謝中的重要性及密切的疾病相關性,其相關研究有了迅速的發(fā)展.依據(jù)酶的功能重要性及在中國(或是亞裔)人群具有相對較高發(fā)生率和突變導致的功能變化已知的原則,選擇了其中CYP 1A2,CYP 2D6,CYP 2C

3、19,CYP 2C9和CYP 3A4五個重要基因的8個等位基因為研究對象,旨在嘗試以高效適用的技術手段,分析調查中國人群的代謝酶基因特點,獲得獨立、實用的藥物代謝酶遺傳學特點與功能關系的數(shù)據(jù)資料,為臨床個體化醫(yī)療和藥物開發(fā)提供幫助.該研究利用基因芯片技術同步規(guī)模化檢測和易于實現(xiàn)常規(guī)化的優(yōu)勢,依托該單位的芯片生產(chǎn)制備平臺,設計了包含上述功能位點的低密度基因分型芯片,并對相關的標本處理、多重擴增以及混合雜交等技術環(huán)節(jié)進行優(yōu)化,建立了一套可行