血必凈對豬原位肝移植缺血再灌注損傷的保護作用.pdf

1、目的:通過本實驗,探討血必凈對豬肝移植缺血再灌注損傷是否更具有保護作用及進一步研究肝移植缺血再灌注損傷的機制,掌握相關肝移植技術。
　　材料與方法:
　　(1)健康巴馬小型豬25頭,隨機分為假手術組(A)、對照組(C)、實驗組(B)。
　　(2)B組行用血必凈注射液+UW液,而C組用不含血必凈注射液的UW液均持續(xù)低壓灌注20分鐘。A組同肝移植受體的肝臟游離方法,不作任何結扎及阻斷,不作肝切除。
　　(3)檢測動物

2、存活率、無肝期及手術時間。BeckmanCX7全自動生化分析儀行術前及術后第1、2、3、7天肝功能檢測:丙氨酸氨基轉移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉移酶(AST)、總膽紅素(TBIL)。
　　(4)取肝組織行蘇木精-伊紅(HE)染色,光鏡觀察肝組織的病理改變。
　　(5)TUNEL法檢測肝細胞凋亡。
　　(6)肝組織超氧化物歧化酶(SOD)檢測:采用黃嘌呤氧化酶法。
　　(7)用免疫組織化學法檢測肝臟組織Bax、B

3、cl-xl的表達,計算其比值。
　　(8)各組數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標準差( x±s)表示,應用SPSS18.0統(tǒng)計軟件包對檢測數(shù)據(jù)進行分析,采用重復測量方差分析,再作兩兩比較,P<0.05具有統(tǒng)計學意義。
　　結果:(1)B組、C組無肝期及手術時間無差異(P>0.05)。
　　(2)術前B組、C組及A組各指標[6]無明顯差異(P>0.05)。
　　(3)移植術后1、2、3、7天B組、C組血清ALT、AST、TBIL水平

4、較術前均明顯升高,但B組值比C組低,兩組每一天的值互相比較(P<0.05)。
　　(4)光鏡下觀察肝組織,C組隨著移植后時間的延長肝臟組織病理改變逐漸加重,肝小葉細胞明顯水腫,呈氣球樣改變,肝巨噬細胞細胞增多、吞噬活躍,易見點狀、灶狀壞死區(qū),匯管區(qū)明顯擴大、水腫,存在炎癥單個核細胞浸潤;B組肝組織病變較對照組輕,隨著時間延長有所恢復;A組肝組織無明顯改變。
　　(5) TUNEL法檢測肝細胞凋亡:A組肝組織凋亡細胞最少,B組

5、次之,C組最多,三組每一天的細胞凋亡率互相比較(P<0.05)。
　　(6)三組每一天的SOD活性值互相比較具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　(7)B組Bax/Bcl-xl比值低于C組(P<0.05)。
　　結論:1、血必凈通過提高SOD的活性,減輕炎癥反應,降低生化值,改善肝功能,對肝臟具有保護作用。
　　2、血必凈能調控Bax、Bcl-xl蛋白的表達,降低它們的比值,抑制肝細胞凋亡,減輕病理改變,從而保護