異丙酚不同麻醉深度下犬腦的攝取和分布.pdf

1、異丙酚(Propofol)是目前最新的靜脈麻醉藥，被廣泛應(yīng)用于臨床麻醉和ICU鎮(zhèn)靜，但其麻醉機制仍有待進一步研究。腦作為靜脈麻醉藥的效應(yīng)器官，腦攝取和腦分布研究是了解其全麻作用機制的重要方面。 Upton等于1988年首先提出了腦攝取概念及其基本研究方法質(zhì)量平衡法則(massbalanceprinciples)。藥物隨血液灌注入腦，由于藥物的分布和消除而從血管內(nèi)分布到血管外進入腦實質(zhì)的過程稱為腦攝取。采用質(zhì)量平衡法則，通過測量局

2、部器官的動-靜脈血藥濃度差來計算局部器官攝取藥物的量；藥物凈攝取量為藥物經(jīng)動脈進入器官實質(zhì)的量；如果藥物在器官內(nèi)不發(fā)生代謝，則器官藥物濃度為藥物凈流量與器官質(zhì)量的比值。基于此法則，上世紀90年代后期有不少學者開始了關(guān)于異丙酚腦攝取的研究?；灸康氖翘剿鳟惐铀幋鷦恿W和藥效學規(guī)律，以更新原有的異丙酚靜脈麻醉方法；主要研究方法是利用色譜分析技術(shù)測量腦循環(huán)動、靜脈血中異丙酚藥物濃度變化來計算異丙酚腦攝取情況。這些研究結(jié)果顯示異丙酚在腦內(nèi)基本

3、不發(fā)生代謝、異丙酚腦攝取平衡滯后于血藥濃度的平衡、異丙酚血藥濃度不能反映麻醉深度、異丙酚全腦攝取量和全腦濃度與麻醉深度存在相關(guān)性。 由于基于質(zhì)量平衡法則的異丙酚腦攝取研究不能反映異丙酚在不同腦區(qū)的實際攝取和分布，Shyr和Larsson分別探索了新的腦攝取研究方法，即基于解剖腦組織的直接腦攝取研究。他們通過比較不同注射速度時異丙酚在大鼠腦內(nèi)的分布情況，發(fā)現(xiàn)中腦對異丙酚的攝取規(guī)律與其他腦區(qū)不同。異丙酚腦攝取和腦分布可能受到注射方式

4、、腦攝取狀態(tài)、物種差異等因素的影響。以前的實驗多采用SD大鼠為實驗動物，由于鼠腦結(jié)構(gòu)和功能與人腦差別較大，難以將實驗結(jié)果進行推廣，因此有必要對更高等的動物加以研究。犬腦為溝回腦，腦功能分區(qū)和結(jié)構(gòu)與人腦相似，腦體積和質(zhì)量較大，解剖標志明顯，利于實驗操作。麻醉深度不同時，異丙酚在腦組織不同區(qū)域的攝取和分布是否一致?是否腦內(nèi)某些區(qū)域?qū)Ξ惐拥臄z取隨麻醉深度的變化而發(fā)生改變?以往的實驗中未曾涉及過，有必要進行研究。本研究通過解剖不同麻醉深度下的

5、犬腦，采用高效液相色譜紫外法(High-pressureliquidchromatographyultra-violetspectroscopy，HPLC-UV)測量腦組織不同區(qū)域的異丙酚濃度，探討異丙酚不同麻醉深度下的犬腦不同區(qū)域組織對異丙酚的攝取和分布規(guī)律。 材料和方法： 1.實驗動物準備與分組： 健康雄性成年犬12只，體重10-12kg，年齡12-18個月，隨機分淺麻醉組(S組)和深麻醉組(A組)。實驗均安

6、排在白天，實驗前給予禁食、禁飲12小時。實驗時由右后肢大隱靜脈建立靜脈通路并保持通暢。 2.麻醉實施： S組：靜脈注入異丙酚4.5mg·kg-1，注射時間為15s。預(yù)定麻醉狀態(tài)為神情淡漠，無刺激時閉眼，給于止血鉗夾尾刺激時能睜眼。 A組：異丙酚7mg·kg-1靜脈注射，注射時間為15s。預(yù)定麻醉狀態(tài)為眼瞼反射和踏板反射消失。 3.標本采集： 達到預(yù)定麻醉狀態(tài)后(S組利多卡因浸潤麻醉)解剖犬右側(cè)頸內(nèi)

7、動、靜脈，分別取血2ml快速注入抗凝管中，4℃冰箱中保存。斷頭法處死實驗犬。無菌條件下去除顱蓋等組織，專人解剖獲取額葉、頂葉、顳葉、海馬、扣帶回、丘腦、中腦、橋腦和小腦等組織，-17℃低溫冰箱中保存。 4.標本處理： 血標本在4℃低溫離心機中離心30min(10000r·min-1)。取血漿200μl置于EP管中，加入乙腈400μl，渦旋器震蕩2min后再離心10min(10000r·min-1)，取上清液于EP管中保存

8、。 腦組織樣品精確稱量后置于勻漿器中，加入乙腈(2ml·g-1)充分勻漿，勻漿液離心4min(10000r·min-1)后取上清液于EP管中保存。 5.異丙酚色譜分析： 采用HPLC-UV-沉淀法測量異丙酚濃度，外標物為異丙酚標準品。色譜柱為DikmaDiamonsilC18柱(200mm×4.6mm，5μm)，柱溫4℃。流動相A為乙酸胺(1mmol·L-1)和乙酸(1g·L-1)，流動相B為甲醇，A：B為25：

9、75。自動進樣量為20μl，流速1ml·min-1，檢測波長270nm。 6.數(shù)據(jù)分析： 采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包，計量資料以均數(shù)±標準差(-x±s)表示。組內(nèi)頸內(nèi)動脈和靜脈血漿異丙酚濃度比較采用兩樣本均數(shù)比較的t檢驗，組間異丙酚血漿濃度比較采用析因設(shè)計資料的方差分析(factorialanalysis)。組內(nèi)不同標本中異丙酚濃度比較采用完全隨機設(shè)計資料的方差分析(one-wayANOVA)，多重比較采用SNK檢驗

10、；組間相同部位標本中異丙酚濃度比較采用配對計量資料的t檢驗及析因設(shè)計資料的方差分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果： 1.麻醉狀況： 所有實驗動物均安全迅速地達到預(yù)定麻醉狀態(tài)并維持穩(wěn)定，無嘔吐、窒息、呼吸暫停等不良反應(yīng)。 2.異丙酚血漿濃度： S組頸內(nèi)動脈和頸內(nèi)靜脈血漿異丙酚濃度為8.19±0.13和3.19±0.07μg·ml-1，二者差異有統(tǒng)計學意義(t=81.381，P=0.000)

11、，A組頸內(nèi)動脈和頸內(nèi)靜脈血漿異丙酚濃度分別為11.71±1.63和5.42±0.80μg·ml-1，二者差異有統(tǒng)計學意義(t=8.460，P=0.000)。單次給藥的劑量與動靜脈血漿的異丙酚濃度不存在交互效應(yīng)(F=2.975，P=0.100)。 3.異丙酚腦組織濃度： S組犬腦額葉、頂葉、顳葉、海馬、扣帶回、丘腦、中腦、橋腦、小腦異丙酚濃度分別為3.63±0.12、3.50±0.13、3.36±0.06、3.08±0.5

12、0、3.78±0.85、4.33±0.33、4.15±0.87、4.90±0.93、3.67±0.81μg·g-1。各區(qū)域腦組織異丙酚濃度差異有統(tǒng)計學意義(F=94.639，P=0.000)，橋腦異丙酚濃度高于其他腦區(qū)(P<0.05)，而海馬低于其他腦區(qū)(P<0.05)。 A組犬腦額葉、頂葉、顳葉、海馬、扣帶回、丘腦、中腦、橋腦、小腦異丙酚濃度分別為：8.01±0.99、8.02±1.01、8.18±1.05、5.59±0.75

13、、8.23±1.03、10.64±1.66、8.56±1.05、8.39±1.07、7.84±0.96μg·g-1。各區(qū)域腦組織異丙酚濃度差異有統(tǒng)計學意義(F=8.316，P=0.001)，丘腦異丙酚濃度高于其它腦組織(P<0.05)，海馬則低于其它腦組織(P<0.05)。 S組和A組間各個相應(yīng)腦組織異丙酚濃度差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。單次給藥的劑量和各區(qū)域腦組織異丙酚的濃度有交互效應(yīng)(F=5.145，P=0.000)。