寄生于南方根結線蟲卵的長梗木霉幾丁質酶基因TlChi46的克隆.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、植物病原線蟲造成的土傳植物病害對農業(yè)生產造成了相當大的經濟損失。根結線蟲病害頻繁為害世界范圍的蔬菜生產，尤其是我國保護地最常出現(xiàn)的土傳植物病害。化學殺線劑已被廣泛的用于線蟲病害的治理，但化學殺線劑對土壤環(huán)境和人類健康的高毒性，已使得如溴甲烷等殺線劑已經或即將限制其在農業(yè)生產中的應用。采用生防真菌防治線蟲的生物防治方法符合可持續(xù)治理的觀念，正發(fā)展成為治理根結線蟲的不可或缺的方法。
　　為進一步篩選高效寄生線蟲真菌和闡明其寄生線蟲卵的

2、機理，本研究從湖北省煙草南方根結線蟲卵分離到1株具高效生防潛力的菌株HBF1。形態(tài)學、rDNA-ITS和翻譯延長因子tef1-α序列分析鑒定該菌為長梗木霉菌Trichoderma longibrachiatum，該菌是1株可以產生幾丁質酶的南方根結線蟲卵寄生真菌，其對南方根結線蟲卵第10天寄生率為80.45％。分別采用NAG（N-乙酰葡聚糖胺）和pNP（對硝基苯酚）制作的標準曲線測定HBF1菌株分泌的幾丁質降解酶系和外切幾丁質酶的活性，

3、這兩者幾丁質酶的活性在接種后的第10天分別達到最大為30.12和24.88μmol/h/mL。
　　為明確具體功能基因在長梗木霉菌株防治根結線蟲病害中的重要作用，本文通過簡并引物設計和RACE技術克隆其幾丁質酶基因，分析該基因序列及與其他幾丁質酶的同源性。本研究首次從長梗木霉HBF1菌中克隆到1個幾丁質酶基因TlChi46，該基因DNA全長1793bp，含3個內含子和1個1272bp的開放閱讀框，編碼423個氨基酸，理論分子量45

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