NK、T混合淋巴細(xì)胞與順鉑聯(lián)合對(duì)乳腺癌細(xì)胞株體外殺傷研究.pdf

1、[背景與目的]1987年Fowlkes等首先在小鼠胸腺內(nèi)發(fā)現(xiàn)同時(shí)表達(dá)TCRVαβ和NK1.1抗原的NKT細(xì)胞(natural killer T cells)，它與一般T細(xì)胞不同之處在于，NKT細(xì)胞只識(shí)別由細(xì)胞表面CD1 d分子遞呈的脂類抗原。其天然配體不明。NKT細(xì)胞被激活后還可分化成具有細(xì)胞毒性和殺傷活性的效應(yīng)細(xì)胞，在抗腫瘤免疫、保護(hù)性免疫應(yīng)答及免疫調(diào)節(jié)中發(fā)揮重要作用。研究表明，惡性腫瘤的發(fā)生與人體免疫力下降有關(guān)，化療藥物可導(dǎo)致人體免

2、疫抑制力下降，能否利用NKT細(xì)胞的細(xì)胞毒及免疫調(diào)節(jié)中作用來達(dá)到抗腫瘤的效果成為人們關(guān)注的熱點(diǎn)，研究NKT細(xì)胞與化療藥物對(duì)腫瘤細(xì)胞的作用在臨床中有著現(xiàn)實(shí)意義。NK、T混合淋巴細(xì)胞(NKTm，以NKT細(xì)胞亞群為主)聯(lián)合化療藥是產(chǎn)生對(duì)腫瘤的協(xié)同還是拮抗作用，兩者如何序貫使用才能對(duì)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生最佳的抑制作用等問題是首先要考慮到問題。在此基礎(chǔ)上才能繼續(xù)探討產(chǎn)生此種作用的具體機(jī)制。本研究采用我科實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的NKTm聯(lián)合順鉑，作用于乳腺癌細(xì)胞系MDA

3、-MB-231，觀察免疫細(xì)胞同化療藥物的作用，及兩者在不同時(shí)序下聯(lián)合對(duì)乳腺癌細(xì)胞的作用。通過對(duì)結(jié)果的分析，探討在體外情況下NKTm細(xì)胞對(duì)乳腺癌細(xì)胞系的抑制作用，了解在細(xì)胞毒藥物的作用下，免疫細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞系在自身生存及相互作用有何改變，為臨床細(xì)胞免疫治療同化療聯(lián)合時(shí)機(jī)提供一些思路。
　　 [方法]收集并選定我科實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的具有一定殺傷活性的NKTm細(xì)胞，T細(xì)胞亞群檢測(cè)，然后用NKTm細(xì)胞同順鉑(DDP)作用，MTT法檢測(cè)繪制時(shí)間

4、生存率曲線；培養(yǎng)乳腺癌細(xì)胞系MDA-MB-231，分別運(yùn)用MTT及流式細(xì)胞儀兩種檢測(cè)方法，觀察在NKTm細(xì)胞及順鉑在不同時(shí)序下對(duì)乳腺癌細(xì)胞系的抑制情況。
　　 [結(jié)果]從不同個(gè)體NKTm細(xì)胞的體外對(duì)乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231的抑制實(shí)驗(yàn)可以看到，NKTm細(xì)胞具有一定的體外抑制作用，但不同個(gè)體的NKTm細(xì)胞的抑制率不同。對(duì)NKTm、DDP相互作用來說，在DDP濃度一定情況下，隨著DDP作用時(shí)間延長NKTm細(xì)胞的存活率下降明顯，兩

5、者聯(lián)合使用可觀察到對(duì)乳腺癌細(xì)胞系的抑制率增強(qiáng)；NKTm細(xì)胞對(duì)腫瘤抑制呈現(xiàn)效靶比依賴性(p<0.05)；相比較對(duì)應(yīng)時(shí)序下的抑制率，可見先NKTm后聯(lián)合DDP各組對(duì)腫瘤抑制率都大于先DDP后聯(lián)合NKTm各組。
　　 [結(jié)論]
　　 1、不同個(gè)體的NKTm細(xì)胞對(duì)乳腺癌細(xì)胞MDA-MB-231的抑制率不同。
　　 2、NKTm細(xì)胞對(duì)乳腺癌細(xì)胞系體外抑制率具有效靶比依賴性。
　　 3、NKTm在DDP作用下，隨著作