脫氮菌的篩選及在凡納濱對蝦生物絮團養(yǎng)殖中的應用.pdf

1、隨著水產養(yǎng)殖業(yè)的高速發(fā)展，為了追求利益的最大化，對蝦的水產養(yǎng)殖中往往采用高密度工廠化養(yǎng)殖方式。然而高密度工廠化的養(yǎng)殖模式伴隨著很多問題，殘餌、有機質以及有毒無機氮的積累造成養(yǎng)殖水體的污染，養(yǎng)殖動物經常得病死亡。生物絮團技術是通過向養(yǎng)殖水體添加有益微生物的方式，使其與水體中的有機質、原生動物、藻類等經生物絮凝作用結合形成絮狀物。這些有益微生物既可以利用養(yǎng)殖動物的代謝產物和殘余餌料，達到凈化水質的目的，又可以被養(yǎng)殖動物所攝食，提高餌料系數。

2、主要研究結果如下：
　　1、脫氮菌的篩選鑒定以及其去除無機氮能力的檢測
　　從養(yǎng)殖水體和蝦腸中篩選分離出幾株具有脫氮效果的菌株，通過脫氮對比實驗篩選出兩株脫氮能力較好的細菌，分別命名為20131023A05和20131023XS-1-3，經過16SrDNA測序分析，20131023A05屬于假交替單胞菌屬，20131023XS-1-3屬于溶藻弧菌。在實驗室條件下初步探討細菌的生長情況、脫氮能力大小。研究結果顯示：這兩株菌主要

3、具有去除氨態(tài)氮的能力，而對亞硝酸氮的去除不明顯，在28℃、pH7.2，搖床轉速150r／min時細菌20131023A05的對無機氮的去除能力達到49.9％，20131023XS-1-3對無機氮的去除能力達到41％。試驗結果表明這兩株菌具有高效的去除無機氮的能力，所以應用這兩株菌在對蝦生物絮團養(yǎng)殖中。
　　2、兩株脫氮菌在凡納濱對蝦生物絮團養(yǎng)殖中的應用
　　單獨將假交替單胞菌和溶藻弧菌以及兩種細菌等量混合加入到養(yǎng)殖凡納濱對蝦

4、的水體中，通過添加赤砂糖提供有機碳源并充分通氣，生成生物絮團，并設置空白組等幾個對照組，結果表明將這兩株菌添加到養(yǎng)殖水體中，通過添加碳源以生物絮團模式養(yǎng)殖，可以有效降低養(yǎng)殖水體中氨氮含量，減少養(yǎng)殖水體中氨氮的污染。再以這兩株菌為主形成的生物絮團養(yǎng)殖系統(tǒng)中，能夠提高凡納濱對蝦的成活率。
　　3、對副溶血弧菌具有拮抗作用細菌的篩選
　　通過分離凡納濱對蝦養(yǎng)殖水體及凡納濱對蝦體內細菌，進行分離篩選出對實驗室保存的副溶血弧菌2013

5、0629002S01具有拮抗作用的細菌。通過安全性養(yǎng)殖實驗，證明菌株對養(yǎng)殖對蝦沒有致病性以及致死作用，通過濾紙片法進行驗證菌株對副溶血弧菌具有拮抗作用，隨著副溶血弧菌濃度的降低，抑菌圈的大小逐漸增大，篩選出來的五株菌中，菌株201310232-102的抑菌圈直徑最大，抑菌效果最好，平板上副溶血弧菌達到時抑菌圈直徑大小為1.57×103CFU/cm時抑菌圈直徑為14.34±0.08mm，六株菌中，抑菌圈直徑最小的是菌株2011072700

6、1-9。通過向對蝦養(yǎng)殖水體中添加一定濃度的實驗菌株，向日本對蝦體內注射副溶血弧菌，與空白組進行對照驗證添加的細菌在水產養(yǎng)殖中的對蝦對副溶血弧菌的作用效果，實驗中空白組日本對蝦成活率最低，各個加菌組日本對蝦存活率都高于空白組，說明菌的添加提高了日本對蝦的成活率，其中20131023A05、201310232-102兩組的成活率最高，達到了50％，添加菌株20110727001-9組存活率在這幾組中最低。向養(yǎng)殖水體中添加對副溶血弧菌具有拮抗