農(nóng)桿菌介導(dǎo)PRK基因轉(zhuǎn)化水稻及鑒定.pdf

1、根據(jù)光合作用碳同化途徑的不同，陸生植物可以分為三種光合類型：C3型、C4型和CAM型。與C3植物相比較，由于C4植物和CAM植物葉片中具有獨特的Kranz結(jié)構(gòu)和C4循環(huán)途徑，因而具有較高的光合效率，水分利用效率和養(yǎng)分利用效率。C4(CAM)植物的這一優(yōu)勢在高溫、高光強、干旱等逆境條件下尤為明顯。為了提高水稻等C3糧食作物的光合效率，進而提高產(chǎn)量，人們正在嘗試通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)，在C3植物中建立類似C4循環(huán)的途徑以提高轉(zhuǎn)基因植株的碳同化能力。

2、PRK是光合作用C4循環(huán)的關(guān)鍵酶之一。本研究運用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的方法將C3植物擬南芥的PRK基因轉(zhuǎn)入C3植物水稻，增加水稻中PRK的表達量，以達到類似C4植物中PRK的作用的目的。進而初步研究了轉(zhuǎn)PRK基因水稻的光合生理的變化；為通過基因工程的手段提高水稻的光合效率提供了一定技術(shù)途徑和理論基礎(chǔ)。 本論文的主要研究結(jié)果如下： 1.根據(jù)已經(jīng)發(fā)表序列設(shè)計特異引物擴增了水稻的CAB啟動區(qū)和PRK(Atlg32060)基因。構(gòu)建了植物

3、表達載體CAB-PRK-pSN1301，并將該表達載體轉(zhuǎn)化根癌農(nóng)桿菌EHA105，為后續(xù)的遺傳轉(zhuǎn)化提供條件。 2.農(nóng)桿菌EHA105介導(dǎo)表達載體CAB-PRK-pSN1301轉(zhuǎn)化水稻愈傷組織，在含有潮酶素的培養(yǎng)基上篩選獲得水稻擬轉(zhuǎn)基因植株。對其中10株擬轉(zhuǎn)基因植株的基因組DNA進行PCR檢測分析，初步證明了PRK(Atlg32060)基因己經(jīng)整合到上述T0代水稻中。 3.從對具有四葉的植株的不同葉片的葉綠素含量的測定結(jié)果