基于液質(zhì)聯(lián)用的胃癌血清中O-糖組學分析.pdf

1、蘇州大學學位論文獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明：所提交的學位論文是本人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不含其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不含為獲得蘇州大學或其它教育機構(gòu)的學位證書而使用過的材料。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人承擔本聲明的法律責任。論文作者簽名：盔旺乙日期：旌縫趔I基于液質(zhì)聯(lián)用的胃癌血清中o糖組學分析中文摘要中文摘要目的：運用糖組學

2、分析方法，比較胃惡性腫瘤患者和正常對照血清樣本中Oglycan的表達情況，建立血清O—glycan數(shù)據(jù)庫，找出差異性表達的0一glycan。從而找到胃惡性腫瘤相關(guān)的特征性O(shè)—glycan，為胃惡性腫瘤的診斷提供新的靶點，評估其診斷價值。并為其他腫瘤血清樣本中0一glycan的研究提供分析基礎(chǔ)。方法：1)利用非還原性方法釋放157例胃惡性腫瘤患者和144例正常對照血清樣本中O—glycan，并用PMP標記；2)通過SPE柱層析方法純化0一

3、glycan3)0glycan在LCMS和LC—MS／MS的J下離子模式下進行定性和定量分析；4)對胃惡性腫瘤患者和正常對照血清樣本中Oglycan進行提取離子流，并進行相對定量；5)利用偏最d乘法(PLS—DA)、t檢驗、受試者工作特征曲線(ROC)分析所有O—glycan對應(yīng)的提取離子流強度；6)分析O—glycan與臨床上使用的腫瘤標志物之間的相關(guān)性；7)利用免疫組化的方法分析在胃惡性腫瘤組織和對應(yīng)的癌旁組織中MUCl以及Tn—M

4、UCl的表達。結(jié)果：1)OglycanCorel、Core2、STantigen和Core2合成的復雜糖鏈(m／z73333、m／z80942)在胃惡性腫瘤血清中表達上調(diào)(P00001)；2)Core3、m／z52975、diSTantigen在胃惡性腫瘤血清中顯著下調(diào)(P0001)；3)通過LC—MS／MS分析清楚上述離子的結(jié)構(gòu)信息；4)通過Pearson相關(guān)性分析，得出血清中O—glycan與血清中分泌型CEA和MUCl相關(guān)性顯著；

5、5)通過免疫組化得出胃惡性腫瘤組織中MCUl顯著上調(diào)及糖基化異常。結(jié)論：在本研究中通過非還原性解離和PMP標記，并用LCMS和LCMS／MS能夠?qū)崿F(xiàn)對血清中O—glycan的定性和定量分析；并且經(jīng)過統(tǒng)計分析，證明了157例胃惡性腫瘤患者和144例正常對照血清中O—glycan的差異，且血清中的O—glycan和糖蛋白(MUCl、CEA)相關(guān)性顯著；并且這些糖蛋白在胃惡性腫瘤組織中的糖基化修飾也發(fā)生異常。關(guān)鍵詞：胃惡性腫瘤，血清，0gly