雙酚A對SD大鼠雄性生殖發(fā)育毒性及機制的研究.pdf

1、雙酚A(BisphenolA，BPA)是環(huán)境雌激素的一種，是一類苯酚衍生物，廣泛應用于殺真菌劑、染料及制造機械儀表、醫(yī)療器械、食品包裝材料等，環(huán)境分布廣泛。許多環(huán)境內分泌干擾物的實驗研究結果證實BPA具有模擬雌激素的作用，可以模擬雌激素與體內雌激素受體結合，干擾機體的內分泌代謝，導致健康危害效應。目前，有關BPA對SD大鼠F1雄性子代生殖發(fā)育毒性和功能損傷機制的報道相對較少，本研究選擇BPA為研究對象，通過體內實驗探索BPA對斷乳期F1

2、雄性子代SD大鼠生殖系統(tǒng)發(fā)育的影響以及體外實驗研究BPA對大鼠睪丸支持細胞(Sertolicells)功能的影響及其損傷機制。 從孕O天對母鼠染毒50mg／kg、1.00mg／kg、200mg／kgBPA至斷乳期停止染毒，觀察n雄性子代性器官發(fā)育及體內性激素水平的變化，并對睪丸的Bax、Bcl-2、PCNA、ER、HSP70、Vimentin的表達進行免疫組織化學分析。實驗結果顯示，FO親代母鼠經BPA持續(xù)染毒后，斷乳期末200

3、mg／kgBPA實驗組FO親代母鼠血清PRL水平顯著升高，100mg／kg、200mg／kg組E2水平顯著升高。F1子代，BPA染毒劑量與血清E2水平呈正相關，與血清T水平呈負相關，200mg／kgBPA組FSH下降，100mg／kg、200mg／kg組睪丸臟器系數較對照組明顯減小。免疫組織化學結果可見實驗組睪丸Bax在生精小管上皮表達增強，Bcl-2和PCNA表達減弱，說明睪丸增殖減弱，凋亡增強，提示實驗組生精小管發(fā)育滯后。此外生精上

4、皮的ER表達實驗組均低于對照組，提示ER調控的各種轉錄和表達受阻。HSP70在生精細胞中的表達也明顯下降，由于它參與生精細胞的減數分裂，說明BPA能阻礙初級精母細胞發(fā)育成為次級精母細胞和精子細胞。BPA能抑制睪丸支持細胞波形蛋白(Vimentin)的表達，且隨著染毒劑量增高，表達減弱，提示BPA影響支持細胞骨架。 在體外分離培養(yǎng)SD大鼠睪丸支持細胞，設置空白對照和溶劑對照組，通過MTT法測定細胞增殖和FCM分析細胞周期分布，BP

5、A使睪丸支持細胞的存活率大大降低，且干擾其細胞周期分布。免疫細胞化學結果顯示，10-4mol／L、10-Smol／LBPA實驗組顯著抑制大鼠睪丸支持細胞PCNA的表達，說明BPA能抑制大鼠睪丸支持細胞正常增殖。BPA在10-4mol／L、10'5mol／L、10-6mol／L劑量組顯著抑制大鼠睪丸支持細胞內Vimentin的表達，說明BPA能直接影響支持細胞骨架，干擾其功能。通過本研究發(fā)現，BPA導致F1雄性子代生殖發(fā)育毒性的機制，既有