瑞舒伐他汀預處理對高脂血癥大鼠局灶性腦缺血再灌注后STAT3、JAK2、TNF-α表達的影響.pdf

1、目的:研究瑞舒伐他汀預處理對高脂血癥大鼠局灶性腦缺血再灌注后神經(jīng)功能損傷、STAT3、JAK2、TNF-α表達的影響。探討腦缺血預處理對缺血再灌注損傷時STAT3/JAK2信號轉(zhuǎn)導通路的作用，以及瑞舒伐他汀預處理腦保護作用的可能機制。
　　方法:制備高脂血癥大鼠模型:130只雄性SD大鼠隨機分為普通飼料喂養(yǎng)組（10只）和高脂飼料喂養(yǎng)組（120只），普通飼料喂養(yǎng)組以普通飼料自由喂養(yǎng)，高脂飼料喂養(yǎng)組以高脂飼料自由喂養(yǎng)，喂養(yǎng)28d后空腹

2、尾尖靜脈取血測定兩組大鼠血漿總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度膽固醇(LDL-C)，高密度膽固醇(HDL-C)含量，比較存在明顯差異(P＜0.05)，即高血脂大鼠造模成功。隨機將造模成功的高脂血癥大鼠(120只)隨機分為4組:假手術(shù)組(Sham)（30只）腦缺血再灌注模型組(IR)（30只），低劑量瑞舒伐他汀預處理組(LRos)（30只）和高劑量瑞舒伐他汀預處理組(HRos)（30只）。其中假手術(shù)組及腦缺血再灌注模型組一日一次給

3、予滅菌用蒸餾水(1.0mL/100g)灌胃，低劑量瑞舒伐他汀預處理組(LRos)一日一次按瑞舒伐他汀0.5mg.kg-1搗碎后溶于相應體積蒸餾水中灌胃，高劑量瑞舒伐他汀預處理組(HRos)一日一次按瑞舒伐他汀4.0mg.kg-1搗碎后溶于相應體積蒸餾水中灌胃。連續(xù)用藥兩周后除假手術(shù)組外的其他各組采用線栓法制備大鼠右大腦中動脈缺血再灌注模型。各模型組按腦缺血2h再灌注術(shù)后2h、6h、12h、24h、72h5個時間點分組，每個時間點5只大鼠

4、，其中各模型組于缺血2h再灌注24h時間點多增加5只大鼠用于TTC染色計算腦梗死體積，干濕重法測定各組大鼠在不同時間點的腦組織含水量。通過神經(jīng)功能缺損評分判斷模型是否成功及各時間點神經(jīng)功能缺損情況。HE染色病理切片觀察不同時間點腦梗死組織病理改變。免疫組織化學檢測STAT3、JAK2、TNF-α免疫陽性細胞表達水平的動態(tài)變化。
　　結(jié)果:1.神經(jīng)功能缺損評分:假手術(shù)組無神經(jīng)功能障礙;腦缺血再灌注模型組、低劑量瑞舒伐他汀預處理組及高

5、劑量瑞舒伐他汀預處理組均有不同程度的神經(jīng)功能障礙，但同時間點相比，高、低劑量瑞舒伐他汀預處理組神經(jīng)功能缺損評分顯著高于腦缺血再灌注模型組(P＜0.05);高劑量瑞舒伐他汀預處理組與各時間點的低劑量瑞舒伐他汀預處理組相比，腦缺血再灌注后神經(jīng)功能缺損評分升高(P＜0.05)。2.STAT3、JAK2免疫陽性細胞的表達:假手術(shù)組未見STAT3、JAK2免疫陽性細胞的表達;腦缺血再灌注模型組、低劑量瑞舒伐他汀預處理組及高劑量瑞舒伐他汀預處理組在

6、缺血再灌注2h后在缺血側(cè)半暗帶區(qū)和缺血中心區(qū)可檢測到STAT3、JAK2的免疫陽性細胞，其表達在再灌注24h達到高峰，72h后表達下調(diào);高、低劑量瑞舒伐他汀預處理組與相同時間點腦缺血再灌注模型組相比免疫陽細胞的表達明顯降低(P＜0.01);高劑量瑞舒伐他汀預處理組與相同時間點的低劑量瑞舒伐他汀預處理組相比STAT3、JAK2免疫陽性細胞表達明顯降低(P＜0.05)。3.TNF-α免疫陽性細胞的表達:假手術(shù)組TNF-α有少量陽性細胞表達;

7、腦缺血再灌注模型組、低劑量瑞舒伐他汀預處理組及高劑量瑞舒伐他汀預處理組在缺血再灌注2h時間點見TNF-α免疫陽性細胞表達，其主要分布在缺血半暗帶區(qū)及缺血中心區(qū)，且隨時間延長表達量增加，24h達高峰，72h后逐漸下降，表達顯著高于各時間點的假手術(shù)組(P＜0.01);高、低劑量瑞舒伐他汀預處理組與相應時間點腦缺血再灌注模型組相比TNF-α免疫陽性細胞表達明顯減少(P＜0.01);高劑量瑞舒伐他汀預處理組與相應時間點低劑量瑞舒伐他汀預處理組相