口腔鱗癌細胞裂解物致敏的樹突狀細胞免疫活性及其體外抗腫瘤作用的研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學碩士學位論文口腔鱗癌細胞裂解物致敏的樹突狀細胞免疫活性及其體外抗腫瘤作用的研究姓名：齊艷莉申請學位級別：碩士專業(yè)：口腔臨床醫(yī)學指導教師：段玉芹;許彥枝20070301中文摘要效。本研究的目的在于通過比較口腔癌患者的D C 在抗原負載前后表面分子的差異，分泌I L ．1 2 p 7 0 的能力，以及刺激同種異體T 淋巴細胞增殖的能力和殺傷實驗等，以觀察口腔癌患者凍融抗原致敏后的D C 在體外的免疫活性和對口腔癌細胞的特異性殺傷

2、效應，為口腔癌的生物治療提供理論依據(jù)。方法：研究對象為2 0 例經(jīng)術(shù)后病理證實的口腔鱗癌患者f 河北醫(yī)科大學第四醫(yī)院口腔科2 0 0 5 年3 月至2 0 0 6 年1 0月住院) ，均未行過任何抗腫瘤治療，無系統(tǒng)性疾病，不處于急慢性炎癥期的口腔痛初診患者，發(fā)病部位包括舌、頰、牙齦、口底等處，臨床分期為I I I 劃和Ⅳ期，年齡在2 0 ～6 0 歲范圍內(nèi)，性別比為1 ：1 。1 ．外周血樹突狀細胞的分離培養(yǎng)無菌采集每人外周f f f

3、【( 2 0 m 1 ) ，經(jīng)密度梯度離心法分離外周血單核細胞( P B M C ) 為前體細胞。用含1 0 ％胎牛血清的R P M l l 6 4 0 完全培養(yǎng)基培養(yǎng)，在3 7 。C ，5 ％C 0 2 條件下孵育兩小時f 每孔終體積達3 m l 的6 孔培養(yǎng)板中) ，兩小時后，輕輕洗去非貼壁細胞，獲得黏附細胞。黏附細胞經(jīng)含l0 0 0 U ／m l r h G M ．C S F 和5 0 0 U ／m lr h l L 一4 的R

4、P M I 16 4 0 完全培養(yǎng)液誘導培養(yǎng)，3 7 ℃，5 ％C 0 2 孵育，隔天半量換液，于第5 天加入T N F ．a(chǎn) 2 0 0 U ／m l 以促進其成熟。2 ．腫瘤細胞裂解物的制各及D C 的致敏于3 7 ℃，5 ％C O ，條件下以完全培基培養(yǎng)T c a 8 3 細胞，每2 —3 天換液一次，收集對數(shù)生長期的細胞并確定細胞活力在9 5 ％以上，調(diào)細胞濃度為I ×1 0 7 ／m l ，并用反復凍融法制備腫瘤裂解