SPATA12基因作為腫瘤抑制因子的實驗研究.pdf

1、雜合性缺失是抑癌基因的失活中最早出現(xiàn)的一種遺傳學改變,也是與腫瘤的發(fā)生發(fā)展密切關聯(lián)的一種遺傳學改變。雜合性缺失與抑癌基因之間的關聯(lián)使得雜合性缺失的研究已被廣泛應用于尋找抑癌基因。
　　 SPATA12基因是一個與人類精子發(fā)生相關的新基因,定位于染色體雜合性缺失區(qū)域3p14,提示其可能與腫瘤的發(fā)生相關。過去的研究顯示,SPATA12基因作用于Hela細胞時,G0-G1期細胞數(shù)增加,而S期和M期細胞明顯減少,提示SPATA12的表達

2、能延緩腫瘤細胞由G0/G1期進入S期,可能參與了抑制細胞的增殖?；谝陨涎芯勘尘昂凸ぷ骰A,我們認為SPATA12可能具有抑癌基因的某些特性。
　　 在本研究中我們采用組織芯片原位雜交、MTT、平板集落形成、細胞劃痕實驗以及RT-PCR技術等一系列細胞與分子生物學手段來了解SPATA12基因與腫瘤發(fā)生之間的相關性,及其對腫瘤細胞生長、增殖、遷移的影響以及可能機制。
　　 我們先采用高通量的組織芯片原位雜交實驗對SPATA

3、12基因在睪丸癌以及其他多器官腫瘤中的表達缺失頻率進行了研究。結(jié)果顯示:(1)SPATA12在不同類型睪丸腫瘤中的表達完全缺失,推測其可能是一個與男性生殖細胞腫瘤相關的候選抑癌基因。(2)SPATA12基因在卵巢、乳腺、肝臟、大腦等器官的腫瘤組織中表達完全缺失,而在黑色素瘤、胃癌、胰腺癌、結(jié)腸癌、甲狀腺與前列腺癌組織中存在部分缺失。推測SPATA12基因在不同的腫瘤組織中可能存在的突變導致了表達水平的變化。(3)在肺腫瘤組織中,SPAT

4、A12在惡性程度最高的小細胞癌中完全不表達,在非小細胞癌中存在部分表達丟失。在不同種類的非小細胞癌中,又以腺癌的丟失頻率最高,其次為鱗癌、類癌和大細胞癌。說明SPATA12基因在肺腫瘤組織中的缺失頻率與不同病理類型相關。
　　 采用MTT實驗、細胞平板集落形成實驗和細胞劃痕實驗考查了SPATA12基因?qū)δ[瘤細胞生長、增殖和遷移等生物學行為方面的影響。實驗結(jié)果表明:SPATA12可明顯地抑制腫瘤細胞的增殖能力、集落形成能力和細胞遷