多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥表型及基因型分析.pdf

1、目的：分析銅陵市醫(yī)院感染鮑曼不動(dòng)桿菌耐藥性，對(duì)多重耐藥菌株進(jìn)行β-內(nèi)酰胺酶和超廣譜β-內(nèi)酰胺酶表型檢測(cè)，對(duì)各種耐藥基因型進(jìn)行檢測(cè)分析，對(duì)菌株的基因同源性進(jìn)行分子流行病學(xué)調(diào)查。 方法：采用Vitek-32全自動(dòng)細(xì)菌鑒定儀對(duì)2005年銅陵市各醫(yī)院臨床分離的134株鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行鑒定確認(rèn)，K-B法進(jìn)行藥物敏感試驗(yàn)，檢測(cè)分離菌對(duì)15種抗生素的耐藥性，利用“whonet5.3”軟件對(duì)耐藥性結(jié)果進(jìn)行分析。通過表型初篩(K-B法)和表型確認(rèn)(

2、K-B法)試驗(yàn)對(duì)31株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌進(jìn)行超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)檢測(cè)，三維試驗(yàn)進(jìn)行ESBLs和AmpC酶檢測(cè)，協(xié)同試驗(yàn)檢測(cè)金屬酶(MBL)，對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析。采用聚合酶鏈反應(yīng)(PCR)檢測(cè)各類β-內(nèi)酰胺酶類、氨基苷類抗生素耐藥基因以及喹諾酮類相關(guān)gyrA基因，對(duì)結(jié)果進(jìn)行分析。利用脈沖場(chǎng)凝膠電泳(PFGE)進(jìn)行基因同源性分析。 結(jié)果： 1、銅陵市醫(yī)院感染鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)青霉素類，第三、四代頭孢菌素類，單酰胺類，

3、氨基苷類，喹諾酮類及磺胺類抗菌藥物的耐藥率均>50％，多重耐藥菌株近50％。對(duì)酶抑制劑類的頭孢哌酮/舒巴坦耐藥率較低為8.2％，但中介株比例較高為44.8％。對(duì)碳青霉烯類抗生素亞胺培南耐藥率最低為2.2％，出現(xiàn)了耐藥株，甚至出現(xiàn)了“泛耐藥(pandrug resistance)”的鮑曼不動(dòng)桿菌。 2、銅陵市人民醫(yī)院31株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌中，產(chǎn)AmpC酶29株占93.5％；三維試驗(yàn)檢出ESBLs菌株8株，占25.8％，表型確認(rèn)

4、(K-B法)試驗(yàn)檢出3株，符合率37.5％；產(chǎn)MBL5株，占16.1％。 3、銅陵市人民醫(yī)院31株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌中，100％攜帶TEM-1型廣譜β-內(nèi)酰胺酶基因、aacA4氨基糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶基因、有g(shù)yrA型DNA旋轉(zhuǎn)酶基因突變；30株檢測(cè)到AmpC酶基因，占96.8％；29株檢測(cè)到aacC1、aadA1型氨基糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶基因，占93.5％；3株檢測(cè)到OXA-23型碳青霉烯酶基因，占9.7％；各2株檢測(cè)到PER型ESBL

5、s基因和aphA1型氨基糖苷乙酰轉(zhuǎn)移酶基因，分別占6.5％；未檢測(cè)到SHV型β-內(nèi)酰胺酶基因、VEB型ESBL基因，未檢測(cè)到IMP型和VIM型金屬酶基因，未檢測(cè)到OXA-24型碳青霉烯酶基因。 4、對(duì)30株多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌分子流行病學(xué)調(diào)查，結(jié)果顯示27株出現(xiàn)顯著相同條帶，具有高度同源性；2株為相似性；1株為獨(dú)立株。 結(jié)論： 1、銅陵市鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)臨床常用抗生素均有較高的耐藥率，對(duì)青霉素類，第三、四代頭孢菌素

6、類及β-內(nèi)酰胺酶抑制劑復(fù)合制劑敏感性也顯著降低，同時(shí)對(duì)氨基苷類、喹諾酮類、磺胺類耐藥率較高。出現(xiàn)了亞胺培南耐藥菌株。 2、多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌同時(shí)產(chǎn)生多種β-內(nèi)酰胺酶：TEM-1酶、AmpC酶，OXA-23型碳青霉烯酶及金屬酶。產(chǎn)AmpC酶在多重耐藥菌株比例較大，占有重要地位。 3、臨床微生物實(shí)驗(yàn)室采用三維法測(cè)定鮑曼不動(dòng)桿菌ESBLs更準(zhǔn)確。 4、多重耐藥鮑曼不動(dòng)桿菌株中.AmpC酶基因、TEM-1型β-內(nèi)酰胺酶