多西紫杉醇靜脈注射亞微乳的研究.pdf

1、多西紫杉醇(Docetaxel，商品名為T(mén)axotere)是新一代抗腫瘤藥物，它與紫杉醇(Paclitaxel，商品名為T(mén)axol)同屬紫杉烷類，均為FDA批準(zhǔn)的紫杉烷類抗癌藥物。其作用機(jī)制是通過(guò)刺激導(dǎo)管素的聚合，促進(jìn)微管雙聚體裝配成微管并致使微管超穩(wěn)定而抑制微管網(wǎng)動(dòng)力學(xué)重組，最終使細(xì)胞增殖停止在有絲分裂靜止期(G2/M)的階段。多西紫杉醇新穎的作用機(jī)制及其在臨床研究中顯示出的獨(dú)特療效，使得多西紫杉醇及其合并用藥方案在臨床上被越來(lái)越多的

2、應(yīng)用于乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌、胰腺癌、軟組織肉瘤、頭頸癌、胃癌、卵巢癌以及前列腺癌等多種腫瘤的治療。 由于多西紫杉醇以t-丁氧羰基取代了紫杉醇中的苯甲酸基團(tuán)，因而水溶性略大于紫杉醇。盡管多西紫杉醇的水溶性比紫杉醇稍好，但目前上市的多西紫杉醇注射液中仍應(yīng)用Tween80和乙醇作為注射溶媒。市售制劑泰索帝(Taxotere)采用Tween80增溶、乙醇助溶，將其制成一個(gè)注射劑濃縮液和一個(gè)溶劑的兩瓶裝。其中注射劑濃縮液為含有主藥的Twe

3、en80溶液，溶劑為13％(w/w)的注射乙醇，使用時(shí)先將溶劑加入濃縮液中混合均勻，臨用前再用生理鹽水或5％葡萄糖注射液稀釋后使用。這種使用方法操作繁瑣，臨床用藥極不方便，并且在配制過(guò)程中容易產(chǎn)生二次污染，給患者的使用帶來(lái)風(fēng)險(xiǎn)。另外，雖然處方中使用了毒性相對(duì)較小的Tween80和乙醇作為溶劑體系，但在臨床應(yīng)用后仍出現(xiàn)了過(guò)敏反應(yīng)，盡管發(fā)生率較紫杉醇注射劑低，但使用該藥物時(shí)仍然需要對(duì)患者進(jìn)行抗過(guò)敏前處理，防止過(guò)敏反應(yīng)的發(fā)生。并且，Tween

4、80還可能產(chǎn)生溶血反應(yīng)。為了消除現(xiàn)有多西紫杉醇制劑所產(chǎn)生的一系列問(wèn)題并解決多西紫杉醇溶解度低的缺點(diǎn)，本課題研制了多西紫杉醇靜脈注射亞微乳，以期為多西紫杉醇的新劑型開(kāi)發(fā)提供研究基礎(chǔ)。 本課題研究的主要內(nèi)容包括： 1．多西紫杉醇亞微乳的處方前研究。建立了多西紫杉醇亞微乳的HPLC含量測(cè)定方法，該方法靈敏、精密、便捷、專屬性強(qiáng)，不僅適用于乳劑中藥物含量的測(cè)定，而且可用于多西紫杉醇與其分解產(chǎn)物及其它雜質(zhì)的分離測(cè)定。實(shí)驗(yàn)中還考察了

5、各種外界因素對(duì)主藥多西紫杉醇穩(wěn)定性的影響。結(jié)果表明，堿性環(huán)境對(duì)多西紫杉醇影響最大，高溫、氧化、光照條件次之，而酸性環(huán)境對(duì)藥物的影響相對(duì)較小。 2．多西紫杉醇亞微乳的處方設(shè)計(jì)及制備工藝研究。選取卵磷脂、泊洛沙姆188、油酸及油相的比例進(jìn)行處方的單因素考察，研究其在不同濃度條件下對(duì)亞微乳相關(guān)性質(zhì)的影響，并在此基礎(chǔ)上以穩(wěn)定性參數(shù)為評(píng)價(jià)指標(biāo)，通過(guò)正交設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步對(duì)處方進(jìn)行優(yōu)化。在進(jìn)行制備工藝的研究中，分別考察了乳化方法、乳化溫度、乳化

6、時(shí)間、均質(zhì)壓力及均質(zhì)次數(shù)對(duì)乳化效果的影響，篩選出了最優(yōu)的工藝條件。經(jīng)過(guò)處方工藝優(yōu)化后制備的多西紫杉醇亞微乳穩(wěn)定性好，粒徑分布均勻，50％乳滴的粒徑在169nm以內(nèi)。 3．多西紫杉醇亞微乳的穩(wěn)定性研究。考察了多西紫杉醇亞微乳在高溫、冷凍、光照及低溫條件下的穩(wěn)定性，研究結(jié)果表明：高溫、光照條件會(huì)使藥物含量減小，pH值降低；冷凍條件下乳滴的粒徑顯著增大，并發(fā)生分層現(xiàn)象；而在低溫條件下各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)顯著改變。另外，多西紫杉醇亞微乳在不同稀

7、釋液中的物理穩(wěn)定性研究結(jié)果顯示，各稀釋液在5h內(nèi)均未出現(xiàn)粒徑顯著增大的情況，說(shuō)明該制劑經(jīng)稀釋后不會(huì)引起血管栓塞。 4．多西紫杉醇亞微乳的藥效學(xué)研究。采用移植法建立了荷瘤小鼠模型，通過(guò)監(jiān)測(cè)腫瘤體積的變化、測(cè)定平均瘤重及抑瘤率、觀察腫瘤組織的病理切片等方法，對(duì)多西紫杉醇亞微乳的抗腫瘤作用進(jìn)行考察。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：多西紫杉醇亞微乳治療組荷瘤小鼠的腫瘤組織生長(zhǎng)緩慢，瘤體積和重量的增長(zhǎng)明顯受到抑制；組織學(xué)觀察結(jié)果也顯示出瘤組織具有生長(zhǎng)受抑、

8、壞死明顯等特點(diǎn)。 5．多西紫杉醇亞微乳的體內(nèi)藥代動(dòng)力學(xué)研究。建立了多西紫杉醇體內(nèi)藥物測(cè)定的HPLC法，選取炔諾酮為內(nèi)標(biāo)，以液-液萃取法處理血漿樣品后進(jìn)行測(cè)定。該法簡(jiǎn)單、快捷、靈敏度高，適合多西紫杉醇的體內(nèi)分析研究。多西紫杉醇亞微乳在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力研究結(jié)果顯示，其AUC顯著增加(p<0.05)，清除率CL減小(p<0.05)，表明多西紫杉醇亞微乳在體內(nèi)可保持相對(duì)較高的血藥濃度。 6．多西紫杉醇亞微乳的初步安全性評(píng)價(jià)。通

9、過(guò)異常毒性檢查法、血管刺激性試驗(yàn)以及溶血性試驗(yàn)對(duì)多西紫杉醇亞微乳的安全性進(jìn)行了初步評(píng)價(jià)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，多西紫杉醇亞微乳無(wú)明顯靜脈毒性，對(duì)兔耳靜脈血管無(wú)明顯不良刺激作用，體外無(wú)明顯溶血作用。 7．多西紫杉醇亞微乳的凍干研究。采用冷凍干燥技術(shù)將多西紫杉醇亞微乳制成凍干乳劑。通過(guò)考察凍干保護(hù)劑的類型、濃度及預(yù)凍的溫度、速度對(duì)凍干乳相關(guān)性質(zhì)的影響，對(duì)靜脈注射用多西紫杉醇凍干乳的處方及制備工藝進(jìn)行了初步的研究。研究結(jié)果表明，在考察的五種凍