PPARγ在結締組織病相關的肺間質病變中抗纖維化作用研究.pdf

1、研究背景：
　　 結締組織病(connective tissue disease，CTD)累及肺部的病變多種多樣，表現為氣道、肺間質、肺實質、血管系統及胸膜等部位病變，其中間質性肺疾病(interstitial lung disease， ILD)是CTD累及肺部的主要并發(fā)癥，又稱彌漫性實質性肺疾病，具有相似的影像學、病理學及臨床表現的肺功能紊亂性疾病。有文獻報道CTD患者ILD發(fā)病率達25％，而10年生存率僅為60％，雖然不同

2、文獻報道發(fā)病率及病死率不同，但總體差異不大。CTD-ILD的治療目前多使用激素及免疫抑制劑治療，但總體治療效果不佳且藥物不良反應限制其長期應用。因此迫切需要我們深入了解CTD-ILD發(fā)病機制，以便尋求確切有效的治療方法。
　　 ILD主要病理變化是肺泡慢性炎癥、間質細胞過度增生及細胞外基質過度沉積。在纖維變性過程中存在大量促炎和促纖維化細胞因子參與，其中轉化生長因子(transforming growth factorβ1，TG

3、Fβ1)能介導成纖維細胞的趨化、增殖及分化，促進細胞外基質合成、聚集及減少細胞外基質降解等效應，被認為是肺纖維化過程最關鍵細胞因子。而且我們前期實驗已經證實CTD-ILD患者肺組織中TGFβ1的表達增加，因此阻斷TGFβ1效應可能改善組織纖維化程度，達到抗纖維化效應。近年來體內外實驗研究證實過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferators activated receptor gamma，PPARγ)的配體

4、能通過干擾TGFβ1效應改善肺纖維化程度，但PPARγ干擾TGFβ1效應的具體機制仍不明確，可能是通過影響Smad復合物核內聚集、Smad2/3蛋白的蛋白后修飾及競爭輔活化因子或轉錄復合物與靶基因的結合，達到干擾TGFβ1促纖維化效應。本研究擬通過了解PPARγ配體羅格列酮對TGFβ1誘導的肺成纖維細胞的影響，觀察α-SMA蛋白，Ⅰ型膠原和CTGF mRNA，乙?；疭md3變化，初步探討羅格列酮抗肺纖維化作用及可能機制。
　　

5、研究目的：
　　 1.通過收集CT引導下肺穿刺病人的標本，了解PPARγ在CTD-ILD患者肺組織的表達水平。
　　 2.原代培養(yǎng)人肺成纖維細胞，通過體外實驗了解TGFβ1對人肺成纖維細胞分化的影響及PPARγ配體羅格列酮對TGFβ1誘導細胞分化是否存在抑制效應。
　　 3.通過體外實驗，探討PPARγ配體對TGFβ1誘導細胞分化影響的機制是否是通過與Smad3競爭結合P300實現的。
　　 研究意義：<

6、br>　　 通過以上研究，探討是否由于CTD-ILD患者肺組織中PPARγ表達降低，導致肺纖維化發(fā)生發(fā)展，了解PPARγ配體羅格列酮是否能通過干擾TGFβ1效應實現抗纖維化作用，這種干擾效應是否是通過與Smad3競爭結合P300，進而影響Smad3乙?；?，從而為CTD-ILD的基礎研究提供一些理論依據，為CTD-ILD的治療提供新的靶點。
　　 資料與方法：
　　 1.1研究對象與納入標準
　　 收集2001-

7、2010年在廣東省人民醫(yī)院風濕免疫科就診的CTD-ILD行CT引導下細針穿刺肺活檢術患者37例，女性29例，男性8例，平均年齡47.36±2.24歲，其中SSc6例，SLE5例，pSS5例，PM/DM10例，RA3例，血管炎4例，MCTD4例。選取20例不吸煙并無感染的肺癌患者遠離癌旁的正常肺組織作為對照組，其中女性12例，男性8例，平均年齡45.62±1.12歲。實驗組和對照組年齡及性別差異無統計學意義。
　　 CTD-ILD

8、納入標準:至少符合以下條件的中的①+⑤。①符合各類結締組織病國際通用標準的診斷標準;②有咳嗽、咳痰、胸悶、胸痛及氣促等呼吸道表現，排除阻塞性通氣障礙者;③肺功能:限制性通氣功能障礙、氣體彌散功能降低;④影像學改變:高分辨率CT(HRCT)檢查顯示磨玻璃樣、網格樣、蜂窩樣、纖維條索狀影及囊性變等;⑤肺活檢病理表現:符合2002年美國胸科學會與歐洲呼吸學會(ATS/ERS)制訂病理表現，并排除妊娠、感染、藥物、腫瘤及吸煙等因素。
　　

9、 該研究得到當地倫理委員會批準，且取得所有參與者的知情同意。
　　 1.2實驗方法
　　 1.2.1免疫組織化學檢測肺組織中PPARγ表達:37例CTD-ILD和20例對照組肺組織，石蠟包埋肺組織，免疫組織化學染色。脫蠟至水后，用3％雙氧水作用15min以阻斷內源性過氧化物酶活性，1％Triton X-100透化細胞膜10 min，兔抗人PPARγ單克隆抗體(CST1∶200)，室溫孵育60min，辣根酶標記抗兔二抗（

10、基因公司）室溫孵育30min，二氨基聯苯氨(DAB)顯色，蘇木素復染。陰性對照以磷酸鹽緩沖液(PBS)代替一抗。隨機選取5個*400視野，用IPP軟件，準確選取陽性表達區(qū)域，并計算陽性表達面積占該視野下肺組織的面積比。
　　 1.2.2細胞培養(yǎng):選取年齡＜55歲、無感染、不吸煙患者癌旁正常肺組織，用組織塊法行人肺成纖維細胞（primary human lung fibroblast，HLF）的原代培養(yǎng)。肺成纖維細胞置于37℃5％

11、 CO2培養(yǎng)箱，用達氏修正依氏培養(yǎng)基(DMEM)[4.5g/L葡萄糖、10％胎牛血清(FBS)、0.01％青霉素/鏈霉素及含谷氨酰胺]。流式細胞術檢測波形蛋白以確定肺成纖維細胞類型。第4～10代肺成纖維細胞作為實驗對象。
　　 1.2.3四甲基偶氮唑藍(MTT)法檢測細胞活性:以每孔5×104個細胞鋪于96孔板，細胞處于指數生長期時加入TGFβ1和羅格列酮實驗濃度(1、5、10、20及40μmol/L)于孔板，并設置空白對照，3

12、7℃、體積分數為5％ CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)72h后，加20ul MTT(5mg/ml)繼續(xù)培養(yǎng)4h后，加200ul二甲基亞砜(DMSO)終止培養(yǎng)，37℃孵育30min，測560nm處吸光度（A）值。
　　 1.2.4蛋白印跡法(Westem-blotting)檢測肺成纖維細胞中α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)表達:①肺成纖維細胞按105～106個/孔鋪六孔板，加入不同濃度的TGFβ1（0、1.25、2.5、5、7.5ng/ml）培養(yǎng)4

13、8小時后提取全蛋白，檢測α-SMA②肺成纖維細胞按105～106個/孔鋪六孔板，無血清培養(yǎng)12h后，更換含10％血清DMEM培養(yǎng)基，在加入TGFβ1(5ng/ml)之前2h加入不同濃度羅格列酮，分為TGFβ1(5ng/ml)組及TGFβ1（5ng/ml）+羅格列酮（1、5、10、20和40μmol/L）組，繼續(xù)培養(yǎng)48h，提取全細胞蛋白。③肺成纖維細胞按105～106個/孔鋪六孔板，無血清培養(yǎng)12h后，更換10％血清DMEM培養(yǎng)基，將細

14、胞分為:空白組、TGFβ1(5ng/ml)組、TGFβ1(5ng/ml)+羅格列酮(20μmol/L)組及TGFβ1(5ng/ml)+羅格列酮(20μmol/L)組+GW9662(10μmol/L)組，培養(yǎng)48h，提取全細胞蛋白。用BCA(bicinchoninic acid)法測定蛋白濃度。等量(10～15ug)上樣，5％～10％聚丙烯酰胺凝膠（碧云天公司），電泳分離、電轉及脫脂奶粉封閉后，聚偏二氟乙烯膜(PVDF)4℃分別孵育一抗α

15、-SMA（1∶400博士德），羊抗兔IgG二抗(1∶2000)4℃孵育1h，增強化學發(fā)光法(ECL)顯影、曝光。以甘油醛三磷酸脫氫酶(GAPDH)為內參，重復實驗三次。用Image J軟件測灰度值，進行統計分析。
　　 1.2.5實時熒光定量PCR:檢索NCBI網站GenBank查詢人Ⅰ型膠原、CTGF、GAPDH的mRNA序列，引物由捷瑞生物科技公司設計與合成。GAPDH序列:上游引物5'-GCTGATGATCTTGAGGCT

16、GTTGTC-3'下游引物5'-CGCTGAGTACGTCGTGGAGTC-3'; CTGF序列:上游引物5'-TCGGGAAGGGGCAGTCAGGGCT-3'下游引物5'-CCAACCGCAAGATCGGCGTGTG-3';Ⅰ型膠原序列:上游引物5'-CTTGGTCGGTGGGTGACTCTG-3'下游引物5'-GGCAAGGTGTTGTGCGATGAC-3'。人肺成纖維細胞按106個/ml鋪板，無血清培養(yǎng)12小時后加藥，在加入TG

17、Fβ1(5ng/ml)前2小時加入不同濃度的羅格列酮(1-40μmol/L)，繼續(xù)培養(yǎng)48h， Trizol reagent（Invitrogen，USA）法抽提總RNA。分別用PrimeScriptTM RT Master Mix試劑盒和SYBRTM Premix ExTaqTMⅡ試劑盒(TakaRa,寶生物工程(大連)有限公司）將RNA進行逆轉錄和實時定量PCR擴增反應，具體操作參照試劑盒說明書進行。數據處理:mRNA表達的計算以2

18、-△△CT，△CT=CT（實驗組-對照組）。
　　 1.2.6免疫共沉淀-免疫印跡法檢測乙酰化Smad3表達及Smad3或PPARγ與P300結合情況:肺成纖維細胞按106～107個/瓶培養(yǎng)，按下列條件處理:(1)成纖維細胞中加入TGFβ1(5ng/ml)誘導60、90、180min后收獲細胞提取全蛋白，免疫共沉淀檢測乙?；疭mad3變化;(2)在成纖維細胞中加入TGFβ1(5ng/ml)和（或）羅格列酮(20μmol/L)，分

19、為空白組、TGFβ1(5ng/ml)組、羅格列酮（20μmol/L）組及TGFβ1+羅格列酮組培養(yǎng)90min后，提取全蛋白裂解液檢測Smad3與PPARγ結合P300情況。在(1)(2)條件下處理提取的全細胞蛋白中分別加入預沉淀抗體Smad3（1∶100 CST公司）、P300（1∶100 Invitrogen公司）4℃1h，加入洗滌后Protein G/A agarose（15ul/lug抗體）4℃孵育90min后，4℃14000g6

20、 s離心棄上清，細胞裂解液（不含蛋白酶抑制劑）4℃14000g6秒洗滌混合物3次，棄上清余沉淀約20ul加蛋白變性劑沸水煮5min，-20℃保存行蛋白印跡，5％～10％聚丙烯酰胺凝膠，電泳分離、電轉及脫脂奶粉封閉后，PVDF膜4℃分別孵育一抗Acetylate-Lysine（1∶1000 CST公司）;PPARγ（1∶1000 CST公司）及Smad3（1∶1000 CST公司），羊抗兔/鼠IgG二抗(1∶2000)4℃孵育1h，增強化

21、學發(fā)光法(ECL)顯影、曝光。以GAPDH為內參，重復實驗三次。用Image J軟件測灰度值，統計分析。
　　 1.3統計方法
　　 數據處理使用SPSS13.0軟件進行分析。正態(tài)分布的計量資料用x±s表示，多組資料比較采用單因素方差分析(one-way ANOVA)，進一步的兩兩比較，采用LSD檢驗;非正態(tài)分布的資料用[M(QL～QU)]表示，多組資料比較采用Kruskal-Wallis H檢驗及Mann-Whitne

22、y分析;計數資料比較采用卡方檢驗;檢驗水準p=0.05
　　 研究結果：
　　 2.1免疫組織化學法檢測CTD-ILD患者肺組織中PPARγ的表達降低
　　 對照組肺組織中PPARγ主要表達于肺泡上皮細胞、成纖維細胞、巨噬細胞等中，且主要在胞核中表達。PPARγ陽性表達面積百分比在CTD-ILD患者肺組織中明顯低于對照組[0.92％(1.44％)，3.50％(1.94％)]，差異有統計學意義(Z=-8.92，P＜

23、0.01)。
　　 2.2 MTT檢測細胞活性未受影響
　　 肺成纖維細胞暴露于TGFβ1和不同濃度羅格列酮（1、5、10、20及40μmol/L）72h后，A值分別為（0.35±0.21，0.34±0.34，0.27±0.17，0.19±0.07，0.33±0.36），空白對照組為0.23±0.09，組間比較差異無統計學意義(P＞0.05)，說明加入藥物后細胞活性不受影響。
　　 2.3TGFβ1促進人肺成纖維

24、細胞向肌成纖維細胞分化
　　 與空白組相比，肺成纖維細胞經不同濃度的TGFβ1(0、1.25、2.5、5及7.5ng/ml)誘導48h后，發(fā)現隨著TGFβ1濃度增加，α-SMA相對表達量增加，且具有濃度依賴效應，在TGFβ1濃度5ng/ml時達最佳刺激效應。α-SMA表達量變化在TGFβ11.25ng/ml組與空白組差異無統計學意義(P＞0.05)，在其余TGFβ1組差異均有統計學意義(P＜0.05，P＜0.01，P＜0.01)

25、。
　　 2.4 PPARγ配體能夠顯著抑制TGFβ1誘導人肺成纖維細胞分化。
　　 羅格列酮（1、5、10、20及40μmol/L）干預后與對照組羅格列酮0μmol/L相比α-SMA相對表達量下降，羅格列酮1μmol/L組與對照組羅格列酮0μmol/L組相比較，差異無統計學意義(P＞0.05);而羅格列酮濃度為(5、10、20及40μmol/L)與對照組羅格列酮0μmol/L組相比，α-SMA表達量變化差異有統計學意義

26、(P＜0.05、P＜0.01、P＜0.01、P＜0.01)。
　　 2.5羅格列酮抑制TGFβ1誘導人肺成纖維細胞分化的效應依賴于PPARγ
　　 在人肺成纖維細胞中羅格列酮（20μmol/L）能抑制TGFβ1(5ng/ml)誘導成α-SMA表達，但當加入PPARγ拮抗劑GW9662（10μmol/L）時，α-SMA相對表達量恢復， GW9662能夠大部分抵消羅格列酮的這種抑制效應。在TGFβ1（5ng/ml）+羅格列酮

27、（20μmol/L）組與TGFβ1(5ng/ml)組相比，α-SMA表達量相對降低，差異有統計學意義(P＜0.01);而TGFβ1+羅格列酮+GW9662與TGFβ1(5ng/ml)+羅格列酮(20μmol/L)組相比，α-SMA表達量增加，差異有統計學意義(P＜0.01)。
　　 2.6 PPARγ配體抑制TGFβ1誘導Ⅰ型膠原、結締組織生長因子(CTGF)mRNA表達:
　　 羅格列酮（1、5、10、20及40μmo

28、l/L）干預后與對照組羅格列酮0μmol/L相比Ⅰ型膠原、CTGF-mRNA相對表達量下降，羅格列酮（1、5、10、20及40μmol/L）組與對照組羅格列酮0μmol/L組相比較，Ⅰ型膠原表達量差異均有統計學意義(P＜0.01);而羅格列酮濃度為（1、5、10、20及40μmol/L）與對照組羅格列酮0μmol/L組相比，CTGF-mRNA表達量變化差異也均有統計學意義(P＜0.01)。
　　 2.7 TGFβ1增加肺成纖維細

29、胞Smad3乙?；?br>　　 在人肺成纖維細胞中加TGFβ1(5ng/ml)，在不同時間段用免疫共沉淀-免疫印跡法(IP-WB)檢測乙酰化Smad3表達變化，發(fā)現肺成纖維細胞經TGFβ1誘導60、90及180min后與對照組相比，乙?；疭mad3表達增加，且在90min處達高峰，與空白組相比差異有統計學意義(P＜0.05)。
　　 2.8羅格列酮通過干擾smad3與P300結合，來發(fā)揮抗纖維化效應。
　　 肺成纖

30、維細胞在TGFβ1和（或）羅格列酮誘導下培養(yǎng)90min，TGFβ1組與空白對照組相比Smad3與P300結合相對增加，差異有統計學意義(P＜0.05)，羅格列酮+TGFβ1組與TGFβ1組相比Smad3與P300結合相對減少，差異有統計學意義(P＜0.05)，而PPARγ與P300結合相對增加，差異有統計學意義(P＜0.05)。
　　 討論：
　　 CTD-ILD臨床發(fā)病率和死亡率較高，且缺乏有效的治療方法，因此間質性肺

31、疾病越來越引起人們重視。研究發(fā)現PPARγ具有多種生物學效應，不僅能促進脂肪及脂蛋白代謝，調節(jié)機體穩(wěn)態(tài)，還具有抑制炎癥反應及抗纖維化等作用。PPARγ發(fā)揮作用需要配體激活，因此，我們加入外源性噻唑烷二酮類的人工配體羅格列酮，了解PPARγ在CTD-ILD患者肺組織中抗纖維化作用及可能機制，以期尋求新的治療策略。
　　 我們實驗發(fā)現，CTD-ILD患者肺組織中PPARγ蛋白表達明顯降低，并且PPARγ主要表達于肺泡上皮細胞、成纖維

32、細胞、巨噬細胞等細胞中，這些細胞是肺組織內主要細胞成分，主要參與氣體交換、組織損傷與修復及炎癥反應等功能。其中巨噬細胞可以合成并釋放溶酶體酶和致纖維化因子，刺激纖維細胞增生和膠原合成;上皮細胞對成纖維細胞增生和膠原合成有調節(jié)作用，同時也可以穿越基底膜到達纖維化病灶，經上皮-間充質細胞轉化過程轉化為肌成纖維細胞。有研究發(fā)現PPARγ能夠誘導肺泡上皮細胞凋亡并抑制肺泡上皮細胞向間質細胞轉化，抑制單核細胞趨化蛋白1、白細胞介素-8及抑制單核細

33、胞聚集，減輕炎癥反應。活化的PPARγ還能夠抑制成纖維細胞及肌成纖維細胞增殖、分化及細胞外基質產生。因此PPARγ表達下降在一定程度上加速肺纖維化發(fā)展，那么如果能夠提高PPARγ活性，則很有可能減緩肺纖維化過程的發(fā)生發(fā)展。
　　 我們前期研究發(fā)現過度表達的TGFβ1在CTD-ILD的發(fā)生發(fā)展過程中都起到重要作用，本次實驗結果顯示，PPARγ的配體能抑制TGFβ誘導的人肺成纖維細胞向肌成纖維細胞（Ⅰ型和Ⅲ膠原的主要分泌細胞）轉化，

34、MTT法證實此效應并非PPARγ配體本身毒性所致。與我們研究相似， Milam等和Genovese等發(fā)現PPARγ配體羅格列酮能抑制TGFβ1誘導的成纖維細胞增殖、轉化，改善博來霉素誘導的小鼠肺損傷及纖維化。但目前關于PPARγ配體抑制TGFβ1促纖維化效應的具體機制尚不明確。
　　 我們還發(fā)現，PPARγ配體還能夠顯著抑制TGFβ1誘導的成纖維細胞COL1A1、CTGF mRNA表達。其中COL1A1 mRNA編碼Ⅰ型膠原蛋白

35、，Ⅰ型膠原蛋白是細胞外基質的主要成分，其過度分泌沉積導致肺瘢痕組織形成，促使纖維化發(fā)生。而CTGF是CNN家族成員，能夠促進成纖維細胞增殖、細胞外基質產生及組織肉芽組織形成及不同類型的細胞粘附聚集和膠原收縮。而有研究發(fā)現在CTGF存在條件下， TGFβ1在極低濃度時也能與其受體結合，說明CTGF能加強TGFβ1與其受體結合，引起TGFβ1/Smad通路介導的靶基因轉錄活化，促使纖維化發(fā)生。因此PPARγ配體抑制TGFβ1促纖維化效應可能

36、部分是通過抑制CTGF基因表達實現的。
　　 TGFβ1/Smad信號通路在細胞內發(fā)揮作用，需要TGFβ1受體激活的Smad2/3形成復合物轉移到細胞核結合活化因子結合CBP/P300，再與靶基因SBE序列，調節(jié)靶基因表達。人肺成纖維細胞中Smad3促進TGFβ1誘導膠原收縮，且在TGFβ1誘導基因表達中起重要作用。且有研究發(fā)現博來霉素誘導的小鼠肺纖維化模型中，敲除Smad3基因可緩解肺纖維化程度，說明Smad3在TGFβ1/S

37、mad信號通路中起重要作用。Smad3蛋白可以在通路中發(fā)生磷酸化、乙酰化及泛素化等蛋白修飾，那么PPARγ配體抑制TGFβ1通路效應可能與Smad3蛋白有密切關系。肺成纖維細胞系(A549)中PPARγ配體羅格列酮對TGFβ1誘導的Smad2/3的磷酸化水平變化沒有影響。而我們發(fā)現肺成纖維細胞中加入TGFβ1后，隨著時間延長乙?；疭mad3蛋白表達增加。而蛋白的乙酰化與基因的活躍表達有關，蛋白發(fā)生乙酰化后，發(fā)生染色質構型重建，染色質處于

38、相對松弛狀態(tài)，使蛋白易于與活化因子或其他蛋白相互作用，利于靶基因轉錄調控。蛋白乙?；?去乙?；揎検腔蜣D錄調控的關鍵機制之一，而這種修飾作用分別由組蛋白乙酰轉移酶(HAT)和組蛋白去乙?；?HDAC)調控，所以HAT/HDAC間接調節(jié)基因的轉錄和沉默，而HAT/HDAC平衡的紊亂會使基因表達失控，導致組織纖維化發(fā)生。Smad3蛋白乙?；枰狧AT作用，根據HAT在細胞內分布及誘導乙?；蟮男譃锳型HAT(核內)和B型HAT(胞質

39、)兩類，其中A型HAT中的p300是TGFβ1/Smad通路調節(jié)靶基因轉錄所必須的，且TGFβ1/Smad通路與PPARγ通路在細胞內共用活化因子P300，因此可能存在競爭抑制。正如腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制TGFβ1誘導膠原產生及α-SMA表達是通過與Smad3競爭結合P300。而P300是腺病毒EIA相關的核磷蛋白，具有固定結構，含有組蛋白乙酰化轉移酶區(qū)域(HAT)，能使Smad3的MH2區(qū)K378位點發(fā)生乙?；Ｇ襎GFβ

40、1調節(jié)smad2/3乙?；⒋龠MSmad3與P300結合在其他細胞系中也有被證實。本次實驗中，我們發(fā)現，在人肺成纖維細胞中加入TGFβ1能促使Smad3與P300的結合增多，而加入PPARγ配體羅格列酮后，Smad3與P300結合減少。由于PPARγ通路也需要結合P300，單獨加入配體后，PPARγ與P300結合相對增加，所以PPARγ配體發(fā)揮抗纖維化可能通過與Smad3競爭結合P300，使得Smad3/P300復合物形成減少有關，進而

41、減少靶基因轉錄。在皮膚成纖維細胞中也存在PPARγ配體通過作用轉錄活化因子P300消弱Smad依賴的膠原合成，使得TGFβ1誘導的轉錄效應減弱。另外，PPARγ配體抑制效應也可能通過干擾Smad2/3/4復合物在細胞核內聚集或阻斷Smad復合物與SBE序列啟動子結合，阻斷轉錄過程，而這一原因有待證實。
　　 綜上所述，CTD-ILD患者肺組織中PPARγ的表達量降低，體外實驗發(fā)現PPARγ配體能夠顯著抑制TGFβ1誘導的肺成纖維

42、細胞向肌成纖維細胞轉化，這一作用可能是通過與Smad3競爭性結合P300來實現的。因此，PPARγ配體活化的PPARγ通路有望成為治療結締組織病相關的間質性肺疾病的新靶點。
　　 結論：
　　 1.PPARγ在CTD-ILD中表達降低，不能發(fā)揮抗炎、抗纖維化作用，間接導致肺纖維化發(fā)生發(fā)展。
　　 2.羅格列酮具有抗纖維化效應，且是依賴PPARγ實現的。
　　 3.PPRγ抗肺纖維化效應機制之一是通過與Sm