外周血淋巴細胞HLA-B基因表達與乳腺癌分期、淋巴轉(zhuǎn)移關(guān)系的探討.pdf

1、目的：通過逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(RT-PCR)的方法擴增人類白細胞抗原Ⅰ類分子中B抗原的識別基因，檢測乳腺癌患者外周血淋巴細胞HLA-B基因的表達情況，探討外周血淋巴細胞HLA-B mRNA表達與乳腺癌的分期及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移關(guān)系，為檢測乳腺癌的發(fā)生、發(fā)展、淋巴轉(zhuǎn)移提供有價值的評估指標。
　　 方法：設計、篩選HLA-B的特異性引物，以管家基因葡萄糖-3-磷酸脫氫酶(glucose3-phosphate dehydrogenase，G3

2、PDH)作為內(nèi)參照，運用RT-PCR擴增HLA-B mRNA和G3PDH mRNA。收集35例乳腺癌患者（分為無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和Ⅰ-Ⅱ期組、Ⅲ-Ⅳ期組）和20例正常人、20例乳腺良性腫塊患者的抗凝外周血，提取外周血淋巴細胞，用RT-PCR擴增HLA-B mRNA，其瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果采用凝膠分析軟件Gel pro4.0分析其積分光密度值(IOD)，檢測HLA-BmRNA的基因表達。
　　 結(jié)果：⑴乳腺癌患者PBL H

3、LA-B mRNA的表達明顯低于正常對照組和良性對照組的PBL HLA-B mRNA的表達(P＜0.01)；⑵正常對照組的PBL HLA-B mRNA的表達與良性對照組的PBL HLA-B mRNA的表達無顯著差異(P＞0.05)；⑶乳腺癌患者中無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的PBL HLA-B mRNA的表達相比，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的表達低于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組(P＜0.05)；⑷乳腺癌患者中Ⅰ-Ⅱ期組和Ⅲ-Ⅳ期組的PBL HLA-B mRNA的表

4、達相比，Ⅲ-Ⅳ期組的表達低于Ⅰ-Ⅱ期組(P＜0.05)，有統(tǒng)計學差異。
　　 結(jié)論：①乳腺癌患者外周血淋巴細胞HLA-B mRNA表達的降低，尤其是淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移乳腺癌和Ⅲ-Ⅳ期組更為顯著，導致抗原遞呈能力缺陷，提示宿主HLA的狀態(tài)與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)移相關(guān)，可能是乳腺癌通過HLA途徑逃逸機體免疫監(jiān)視的重要表現(xiàn)。②PBL HLA-B mRNA的表達水平能夠反映乳腺癌進展的程度和淋巴轉(zhuǎn)移的狀況，對乳腺癌的早期輔助診斷、治療和術(shù)后隨訪