從Shh通路探討電針對(duì)缺血性腦卒中的神經(jīng)保護(hù)作用與神經(jīng)干細(xì)胞-祖細(xì)胞的影響.pdf

1、目的:通過電針左側(cè)大腦中動(dòng)脈缺血大鼠患側(cè)肢體“曲池”、“足三里”穴，觀察大鼠腦缺血后左側(cè)大腦皮質(zhì)sonic hedgehog信號(hào)通路相關(guān)分子的表達(dá)及巢蛋白的變化，以探討電針“曲池”“足三里”在治療腦缺血中的機(jī)制。
　　方法:將72只SD大鼠隨機(jī)分為假手術(shù)組24只及MCAO組48只，采用左側(cè)大腦中動(dòng)脈阻塞(Middle Cerebral Artery Occlusion，MCAO)再灌注對(duì)MCAO組對(duì)大鼠進(jìn)行缺血再灌注損傷造模。再灌

2、注后2h對(duì)大鼠進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分，剔除不合格大鼠，并將MCAO組大鼠隨機(jī)分為模型組和電針組，其中電針組每日進(jìn)行電針干預(yù)，取大鼠患側(cè)肢體“曲池”及“足三里”穴，頻率1-20Hz，每日1次，30min/次，共3d.分別于缺血再灌注后24h、48h及72h對(duì)模型組及電針組的大鼠進(jìn)行神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分，并于72h后進(jìn)行取材，采用TTC染色以觀測(cè)電針后MCAO大鼠的腦梗體積變化、采用神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分以評(píng)估MCAO大鼠神經(jīng)功能改善情況、采用homecag

3、e實(shí)時(shí)檢測(cè)大鼠動(dòng)物行為學(xué)上的變化、采用Western blot及realtime PCR檢測(cè)shh信號(hào)通路相關(guān)因子的蛋白及基因表達(dá)、采用免疫組化及免疫熒光檢測(cè)各組大鼠nestin、GFAP形態(tài)學(xué)上的變化。
　　結(jié)果:(1)缺血再灌注24h后，電針組與模型組在神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分上無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)，再灌注72h后，電針組神經(jīng)功能缺損癥狀較模型組明顯改善(P＜0.05);
　　(2)homecage顯示模型組在籠舍內(nèi)總

4、路程短于假手術(shù)組(P＜0.05)，而電針組的總路程長(zhǎng)于模型組(P＜0.05)，模型組的整飾時(shí)間及轉(zhuǎn)彎活動(dòng)時(shí)間短于假手術(shù)組(P＜0.05)，而電針組長(zhǎng)于模型組(P＜0.05);
　　(3)而電針組的腦梗死體積也較模型組顯著減小(P＜0.05);
　　(4)模型組及電針組大鼠皮質(zhì)shh信號(hào)通路相關(guān)因子的蛋白及基因的表達(dá)較假手術(shù)組增高，而電針組的增高較模型組更為顯著(P＜0.05);
　　(5)免疫組化顯示腦缺血再灌大鼠缺血