白藜蘆醇對惡性黑素瘤抗癌機制的實驗研究.pdf

1、華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文白藜蘆醇對惡性黑素瘤抗癌機制的實驗研究姓名：李東升申請學(xué)位級別：博士專業(yè)：皮膚病與性病學(xué)指導(dǎo)教師：李家文201105華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文華中科技大學(xué)博士學(xué)位論文6方法：方法：采用MTT法檢測白藜蘆醇對人惡性黑素瘤細胞系A(chǔ)375及小鼠惡黑細胞系B16F1增殖的影響；AnnexinVPI雙標流式細胞術(shù)檢測白藜蘆醇對A375、B16F1細胞凋亡的影響，PI單標流式細胞術(shù)測定白藜蘆醇對A375、B16F1細胞DNA分

2、布的影響；Western印跡法檢測白藜蘆醇對A375細胞Bcl2、Bax、cyclinD1及p21蛋白表達的影響。結(jié)果：結(jié)果：白藜蘆醇對A375、B16F1細胞具有明顯的抑制增殖作用，其抑制增殖作用呈量效及時效關(guān)系。25μmolL白藜蘆醇作用24h即可誘導(dǎo)A375細胞凋亡，其細胞凋亡率為（16.72.1）%；100μmolL白藜蘆醇作用24h時B16F1細胞凋亡率可達（39.63.3）%。100μmolL白藜蘆醇作用12h時A375細胞

3、凋亡率為（17.21.7）%，作用72h時細胞凋亡率則高達（52.34.1）%；相同濃度白藜蘆醇作用12h時B16F1細胞凋亡率為（18.41.6）%，作用72h時細胞凋亡率則可達（56.74.5）％。白藜蘆醇處理組A375及B16F1細胞周期均發(fā)生變化，細胞周期被阻滯于G1期。此阻滯效應(yīng)隨白藜蘆醇濃度的增加而增加：25μmolL白藜蘆醇作用24h時A375及B16F1細胞G1期比例分別為（40.513.97）％、（41.343.12）

4、％，100μmolL白藜蘆醇作用相同時間時其G1期比例分別為（55.644.95）％、（53.935.12）％。白藜蘆醇明顯下調(diào)A37細胞抗凋亡蛋白Bcl2及細胞周期蛋白cyclinD1的表達，同時上調(diào)促凋亡蛋白Bax及p21蛋白的表達水平。結(jié)論：結(jié)論：白藜蘆醇可通過調(diào)控細胞周期進程、誘導(dǎo)細胞凋亡而有效抑制惡性黑素瘤細胞生長，其調(diào)控細胞周期及誘導(dǎo)細胞凋亡的機制分別與調(diào)節(jié)細胞周期蛋白cyclinD1p21及凋亡相關(guān)蛋白Bcl2Bax的表達