應用SELDI-TOF-MS篩選急性淋巴細胞白血病患兒血清生物標志物的研究.pdf

1、目的： 因早期癥狀不明顯，小兒急性淋巴細胞白血病(acute lymphocytic leukemia (ALL) )診斷時間均較晚，經正規(guī)化療，兒童ALL的治愈率接近80％，但仍有約20％的ALL患兒復發(fā)，其主要原因是緩解時體內仍殘留一定數量的白血病細胞，又稱微量殘留病(minimal residual disease (MRD))。我們用表面增強激光解吸電離飛行時間質譜 (surface enhanced laser des

2、orption/ionization-time of flight-mass spectrometry SELDI-TOF-MS)) 技術結合蛋白芯片檢測ALL患兒治療前、治療完全緩解（complete remission (CR) ）及正常兒童血清蛋白質譜的差異性表達，以發(fā)現ALL的早期診斷的生物標志物以及監(jiān)測微量殘留病的新方法。 方法： 應用表面增強激光解吸離子化飛行時間質譜（SELDI-TOF-MS) 儀檢測結合在

3、蛋白質芯片上的血清蛋白質，獲得27例急性淋巴細胞白血病(ALL)，10例為ALL完全緩解（CR），21例正常對照者血清蛋白表達指紋圖譜，并用Biomarker Wizard和Biomarker Paterns System 5.0軟件對數據進行分析，建立診斷模型。 結果： 在質荷比為1000～20000范圍內，共檢測到三組間有差異的蛋白質峰62個，其中ALL組與正常對照組比較有顯著差異（Ｐ<0.01）的蛋白質峰有30個，

4、高表達的蛋白質峰22個，低表達的蛋白質峰8個;ALL組與CR組間有顯著差異（Ｐ<0.01）的蛋白質峰有11個，高表達的蛋白質峰有9個，低表達的蛋白質峰2個;ALL-CR組與正常對照組間有顯著差異（Ｐ<0.01）的蛋白質峰有5個，高表達的蛋白質峰4個，低表達的蛋白質峰1個; 用Biomarker wizard 軟件對三組血清樣本的蛋白質指紋圖譜進行比較，發(fā)現有最有意義的蛋白質中，質荷比為2770.43的蛋白質最有意義。分析21例正常對照和

5、27例ALL患兒血清的蛋白質組成，用質荷比為2770.43一個蛋白質組成生物標志物，這個生物標志物的分析數據共產生2個終結點，結果發(fā)現該兩個終結點可將正常兒童與ALL患兒準確分組，錯誤分組率為0％。 結論： 1、ALL患兒與正常兒童血清蛋白質組學水平有顯著差異； 2、質荷比（m/z）值為2770.43的蛋白質在ALL患兒血清蛋白質譜中波峰強度明顯升高,可能是ALL的生物標志物； 3、SELDI-TOF-M