shRNA抑制FAK表達治療胃癌轉移實驗研究.pdf

1、目的:構建FAK RNAi慢病毒載體，探討其對胃癌細胞增殖活性、侵襲及轉移能力影響，為胃癌新的基因療法提供依據(jù)。
　　 研究方法:
　　 1.構建FAK RNAi慢病毒載體，通過綠色熒光蛋白報告基因GFP檢測轉基因效率。
　　 2.重組慢病毒感染胃癌細胞SGC7901，MTT法檢測FAK沉默對SGC7901細胞增殖的影響，并通過Western blot法檢測FAK干擾前后SGC7901細胞中FAK表達的變化。

2、r>　　 3.制備Transwell小室，檢測FAK沉默對SGC7901細胞侵襲及轉移能力的影響。
　　 結果:
　　 1.成功構建了靶向FAK的RNAi慢病毒載體，其對胃癌細胞SGC7901細胞具有穩(wěn)定感染能力。
　　 2.MTT檢測并繪制細胞生長曲線，可見干擾組胃癌SGC7901與未處理組及陰性對照組相比，生長明顯抑制(P＜0.05)，未處理組及陰性對照組無明顯差別(P＞0.05)。Western blot

3、方法檢測FAK蛋白水平表達發(fā)現(xiàn)，干擾組胃癌SGC7901細胞較未處理組及陰性質粒對照組，F(xiàn)AK的表達均明顯降低。
　　 3.體外侵襲與轉移實驗：對比未處理組及陰性對照組細胞，干擾組細胞侵襲及轉移能力明顯下降(P＜0.05)，正常組及陰性對照組細胞之間無明顯差別(P＞0.05)。
　　 結論:
　　 1.成功構建FAK的RNAi慢病毒載體。
　　 2.重組慢病毒載體有效抑制感染胃癌SGC7901細胞增殖活性