特發(fā)性血小板減少性紫癜患者B細胞活化因子的表達及其基因多態(tài)性的相關(guān)性研究.pdf

1、目的：了解B細胞活化因子(BAFF)啟動子-871C/T基因多態(tài)性在特發(fā)性血小板減少性紫癜(ITP)患者中的分布，分析該基因多態(tài)性與ITP發(fā)病的相關(guān)性；測定血漿BAFF抗原水平，探討B(tài)AFF抗原與該基因多態(tài)性的關(guān)系。從基因水平進一步研究ITP的發(fā)病機制和危險因素。
　　 方法：
　　 1.標本采集患者來源于山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院血液科2008年5月至2009年11月住院及門診患者共147例，其中男60例，女87例，平均年齡

2、38.5±16.45歲。對照組來自山西醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院體檢中心健康體檢者共117例，其中男45例，女72例，平均年齡32.5±17.31歲。
　　 2.基因組DNA抽提采用離心柱法提取血液標本中單個核細胞基因組DNA。
　　 3.PCR擴增及產(chǎn)物分析采用等位基因特異性聚合酶鏈反應(yīng)方法(AS-PCR)及瓊脂糖凝膠電泳技術(shù)檢測BAFF啟動子-871C/T基因多態(tài)性，根據(jù)電泳條帶來區(qū)分各研究對象的基因型，并統(tǒng)計各基因型及等位基

3、因的頻率。
　　 4.基因測序?qū)Σ糠謾z測為C/C、T/T、C/T的標本進行基因測序，驗證兩種等位基因的存在。
　　 5.采用ELISA法測定72例ITP病例組及45例對照組血漿BAFF抗原水平，分析各基因型之間抗原的相關(guān)關(guān)系。
　　 6.統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS13.0軟件進行統(tǒng)計分析。用基因計數(shù)的方法計算各組基因型頻率和等位基因頻率，計數(shù)資料比較采用x2檢驗。計量資料用中位數(shù)(M)表示，兩組間抗原比較采用Mann

4、-Whitney U非參數(shù)檢驗；各組間三種基因型的抗原比較采用Kruskal-Wallis H非參數(shù)檢驗。p＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 結(jié)果：
　　 1.BAFF啟動子-871位點基因變異為C→T突變，存在C/C、C/T、T/T三種基因型。基因型分布在對照組分別為C/C型55.6％，C/T型33.3％，T/T型11.1％；ITP組的基因型分布為C/C型32.7％，C/T型40.8％，T/T型26.5％。C等位基因頻率

5、和T等位基因頻率在對照組分別為72.6％、27.4％，ITP組分別為53.1％、46.9％。p值均＜0.01。
　　 2.BAFF抗原在ITP初發(fā)組、ITP治療組和對照組分別為875.86(416.89～8331)pg/mL、502.58(226.9～792.23)pg/mL和736.88(353.13～1725.93)pg/mL。三組間BAFF抗原比較x2=29.063,p＜0.01。初發(fā)ITP組和對照組比較，z=2.028，

6、p＜0.05；ITP治療組和對照組比較z=3.497，p＜0.01；ITP初發(fā)組和ITP治療組比較，z=5.162,p＜0.01。
　　 3.ITP初發(fā)組中C/C、C/T和T/T三種基因型BAFF抗原水平分別為753.45(599.95～1335.16)pg/mL、820.03(416.89～1137.17)pg/mL和1256.37(518.74～8331)pg/mL；對照組中三種基因型BAFF抗原分別為599.95(353.

7、13～1045.44)pg/mL、795.19(448.94～1725.93)pg/mL和946.22(820.02～1137.17)pg/mL。初發(fā)ITP組中C/C、C/T和T/T三種基因型BAFF抗原比較x2=4.894,p=0.083；在對照組中三種基因型BAFF抗原比較x2=5.39，P=0.068。
　　 結(jié)論：
　　 1.BAFF啟動子-871C/T基因多態(tài)性與ITP的發(fā)病相關(guān)，該基因可能在ITP發(fā)病過程中具